HBE135-E6E7人支气管上皮细胞系来源于一位54岁男性的正常支气管上皮细胞，患者因鳞状细胞癌接受了肺叶切除手术。研究人员从其支气管上提取细胞，并通过使用携带人乳头瘤病毒（HPV）E6和E7基因的重组逆转录病毒（LXSN16E6E7）感染原代细胞，成功实现了HBE135细胞永生化。在含有0.4mg/mL G418的选择性培养基中，筛选出带有HPV基因的细胞。
HBE135-E6E7细胞系被广泛用于肺癌及支气管上皮细胞的生长和分化研究。HBE135-E6E7细胞系（ATCC编号：CRL-2741）为研究肺癌发生机制及其潜在治疗方法提供重要的实验平台。

HBE135-E6E7细胞特性特征

• 基因表达：HBE135-E6E7细胞系表达高水平的表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子α（TGF-α）和双调蛋白（AR）mRNA，但不表达表皮生长因子（EGF）。这种基因表达模式使其成为研究肺癌及相关疾病的重要模型。

• 永生化机制：HBE135-E6E7细胞通过HPV-16 E6/E7基因的表达实现永生化，这两个基因的表达抑制了细胞周期调控相关蛋白（如p53和Rb），从而使细胞能够无限增殖。

• HBE135-E6E7细胞系广泛应用于支气管上皮细胞的生长、分化及其在肺癌发生发展中的研究。

• HBE135-E6E7细胞还可作为cDNA微阵列研究的参考，用于分析与临床结果或肿瘤生物学相关的癌症图谱。

HBE135-E6E7人支气管上皮细胞参数表

HBE135-E6E7人支气管上皮细胞培养教程

HBE135-E6E7细胞复苏

• 收到HBE135-E6E7细胞后，检查包装是否完好。外壁用75%酒精消毒，确保无污染。

• 将HBE135-E6E7细胞瓶置于37℃培养箱内静置2-3小时，使细胞适应培养环境。

• 显微镜下观察HBE135-E6E7细胞的贴壁情况，确保细胞状态正常。

• 若HBE135-E6E7细胞的生长密度低于60%，应去除运输培养基，加入6-8 mL新配制的完全培养基。

• 若细胞密度达到70%-80%，可以进行传代操作。

HBE135-E6E7细胞传代

• 当HBE135-E6E7细胞生长密度达到70%-80%时，建议进行传代。传代比例为1:2至1:3。

• 使用PBS轻轻洗涤HBE135-E6E7细胞，去除残留的培养基。

• 加入0.25%胰酶消化细胞，待HBE135-E6E7细胞变圆和脱壁后，轻轻吹打悬浮。

• 加入新鲜培养基，将HBE135-E6E7细胞重新分装到新的培养瓶中。

• 传代时，必须用新鲜的培养基替换运输用培养基，确保HBE135-E6E7细胞的正常增殖。

• 传代后的HBE135-E6E7细胞需放回37℃的培养箱中，维持其增殖和生长。

HBE135-E6E7细胞冻存

• HBE135-E6E7细胞在良好生长状态时可进行冻存。冻存液推荐使用含10% DMSO和90% FBS的混合液，将HBE135-E6E7细胞悬浮后分装至冻存管中。

• 将装有HBE135-E6E7细胞的冻存管在-80℃冰箱中预冻过夜，随后转移至液氮罐中保存，以确保HBE135-E6E7细胞的长期储存。