小鼠牙周膜干细胞（原代细胞）

小鼠牙周膜干细胞（Periodontal Ligament Stem Cells，PDLSCs）是从牙周膜组织中分离得到的一类多能干细胞。牙周膜是一种致密结缔组织，位于牙齿根部与牙槽窝骨壁之间，其主要功能是连接牙齿和颌骨，维持牙齿稳定性。该组织内包含成束排列的纤维，这些纤维的一端嵌入牙骨质，另一端附着在牙槽骨壁上。此外，牙周膜还富含血管、神经、淋巴管和上皮细胞，为组织的修复和再生提供必要的支持。

牙周膜干细胞具有自我更新及多向分化的能力，可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞和肌细胞等多种终末细胞类型。这些干细胞来源于中胚层间充质组织，与间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）具有相似的特性，后者广泛存在于骨髓、脂肪组织、滑膜、骨骼肌、脐带及脐带血等组织中。利用MSC在软骨损伤修复中的潜能，相关研究已取得显著进展。牙周膜干细胞在牙周组织的损伤修复及再生过程中也发挥了重要作用，是研究牙周组织疾病及其治疗的重要工具。

小鼠牙周膜干细胞特性特征

小鼠牙周膜干细胞具有良好的自我更新能力，并能够向多种细胞类型分化，包括成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞等。
小鼠牙周膜干细胞具备良好的克隆形成能力，能够在适宜条件下形成独立的细胞集落。
小鼠牙周膜干细胞表面表达多种干细胞标志物，常见的包括：CD146：阳性表达率高达84.26%；STRO-1：阳性表达率约为30.20%；其他标志物如CD34和CD45的表达率较低。
小鼠牙周膜干细胞在成骨诱导条件下，相关基因（如骨形态发生蛋白BMP、碱性磷酸酶ALP等）的表达显著上调。这些基因与成骨分化密切相关，表明PDLSCs在成骨过程中的潜力。
在超微结构观察中，小鼠牙周膜干细胞表现出丰富的粗面内质网和线粒体，显示出其活跃的蛋白质合成能力，这与其高增殖和分化潜能相一致

小鼠牙周膜干细胞参数表

细胞名称	小鼠原代牙周膜干细胞（PDLSCs）
英文名称	PDLSCs，Mouse Periodontal Ligament Stem Cells
细胞来源	实验动物的正常牙周膜组织
细胞形态	成纤维样细胞，贴壁生长
纯度	≥90%
表面标志物	CD146、STRO-1阳性
不含污染	无HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
自我更新能力	良好的自我更新能力
多向分化能力	可向成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞类型分化
主要成分	由致密结缔组织构成，含有神经、血管和淋巴等
培养基	小鼠原代牙周膜干细胞专用培养基
培养条件	37℃，5% CO₂
换液频率	每3天更换一次培养基
传代条件	当细胞汇合度达到80%-90%时进行传代
冻存液	90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存条件	-80℃冰箱逐步降温后转移至液氮储存
澄清度	澄清
pH值	7.3 ± 0.2
内毒素含量	≤10 EU/mL
无菌检测	细菌：阴性；真菌：阴性；支原体：阴性
细胞生长试验	细胞形态正常，生长实验合格
操作环境	所有操作需在无菌条件下进行
观察情况	定期检查细胞状态和生长情况，如发现污染需及时处理
再生医学	在牙周组织再生和修复中发挥重要作用。
疾病模型研究	可用于建立体外模型，以研究牙周疾病的机制。
组织工程	在组织工程和再生医学领域展现出广泛的应用潜力
注意事项	建议用多聚赖氨酸 PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）对接种培养皿包被处理

培养教程

原代小鼠牙周膜干细胞培养教程

小鼠牙周膜干细胞的传代

当小鼠牙周膜干细胞汇合度达到80%-90%时，进行传代操作，以避免过度生长。
加入0.25%胰酶/EDTA溶液，37℃消化2-5分钟，观察细胞开始脱落。
用完全培养基终止消化，并轻轻吹打使细胞均匀分散。
离心沉淀后，重悬细胞，并调整至合适密度。
将细胞接种于新培养板中，继续培养小鼠牙周膜干细胞。

小鼠牙周膜干细胞的冻存

使用90%完全培养基和10% DMSO混合制备冻存液，保证细胞存活率。
将小鼠牙周膜干细胞悬液分装至冻存管，逐步降温至-80℃，并转移至液氮中长期保存。

复苏

将冻存管置于37℃水浴中解冻，同时轻轻摇晃加快速度。
解冻后，加入4 mL完全培养基稀释细胞，离心去除冻存液。
重悬细胞并接种于培养板中，继续培养小鼠牙周膜干细胞。

注意事项

培养和传代过程中，确保操作环境无菌，避免污染对小鼠牙周膜干细胞的影响。
定期观察细胞生长情况，确保小鼠牙周膜干细胞的状态符合实验需求。
妥善处理废弃物，确保实验室安全。