小鼠原代前脂肪细胞是从小鼠白色脂肪组织(如附睾脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪)中分离获得的一类未成熟脂肪细胞,具有显著的增殖能力,并可分化为成熟脂肪细胞。在形态上,前脂肪细胞呈梭形,随着分化进程逐步积聚脂滴,最终转变为成熟的圆形成熟脂肪细胞,这些成熟细胞以胞浆中单一大脂滴为特征,已丧失分裂能力。
前脂肪细胞在体内外均能分泌多种脂肪因子,参与能量代谢、内分泌调节和炎症反应,在肥胖及相关代谢疾病中发挥重要作用。作为脂肪组织中重要的细胞组分,前脂肪细胞不仅是研究脂肪组织功能的理想工具,还被认为在软组织修复等领域具有潜在的应用价值。
小鼠原代前脂肪细胞特性特征
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前脂肪细胞具有增殖能力,能够在体外进行多次分裂,并在适当条件下向成熟脂肪细胞分化。
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小鼠原代前脂肪细胞在体内和体外都参与能量代谢,并在肥胖及相关代谢疾病中发挥重要作用。
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标志物表达:前脂肪细胞因子-1(Pref-1)是其特征性标志物,显示为阳性。
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在分化过程中,前脂肪细胞会表达多种与脂肪细胞功能相关的基因,如PPARγ(过氧化物酶体增殖物激活受体γ)、C/EBPα(CCAAT增强子结合蛋白α)、FASN(脂肪酸合成酶)等,这些基因在脂肪细胞的分化和功能中起关键作用。
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在分化过程中,PPARγ和C/EBPα的表达量通常随着时间的推移而增加,在前脂肪细胞向成熟脂肪细胞转变中的重要作用。
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其他关键基因如HSL(激素敏感性甘油三酯脂肪酶)也在分化过程中表现出显著的表达变化,反映了脂肪代谢的调节机制。
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小鼠原代前脂肪细胞不仅参与能量储存,还通过分泌多种生物活性因子影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应等多种生理过程。
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由于其对外界机械损伤的抵抗力较强,前脂肪细胞被认为有潜力作为软组织缺损的填充材料
小鼠原代前脂肪细胞参数表
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细胞名称
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小鼠原代前脂肪细胞(Preadipocytes)
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英文名称
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Mouse Preadipocyte Cells
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来源
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小鼠白色脂肪组织(附睾、肾周、皮下脂肪)
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细胞形态
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梭形,贴壁生长
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细胞纯度
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高于90%
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鉴定标志物
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前脂肪细胞因子-1(Pref-1)免疫荧光染色阳性
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不含病原体
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不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
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培养基
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F12培养基或DMEM/F12,添加10%胎牛血清(FBS)和抗生素(青霉素和链霉素)
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培养条件
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37℃,5% CO₂
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接种密度
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1.5×10⁴个/cm²
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换液频率
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每3天更换一次培养基
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培养时间
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通常可维持1-2周,具体视实验需求而定
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分化培养基
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DMEM/F12添加10% FBS及分化因子(如胰岛素、地塞米松等)
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分化时间
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通常为7-14天,具体取决于实验设计
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关键基因
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PPARγ、C/EBPα、FASN、HSL等
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基因表达监测
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qPCR和Western blot用于检测关键基因的表达水平
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生物学功能
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参与能量代谢、内分泌调节,影响胰岛素敏感性、血压水平等;
对外界机械损伤的抵抗力较强,有潜力作为软组织缺损的填充材料
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细胞活性测定
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CCK-8法用于评估细胞活性
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油红O染色
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用于鉴定成熟脂肪细胞的脂滴形成
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注意事项
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建议用多聚赖氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)对接种培养皿包被处理
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