小鼠软骨细胞源自小鼠的软骨组织。小鼠软骨细胞的分离一般采用胶原酶和中性蛋白酶联合消化方法。

小鼠软骨细胞再生能力较强。幼稚的软骨细胞具有椭圆形态，体积相对较小，细胞核染色较浅，细胞质呈弱碱性。而成熟的软骨细胞多呈2-8个成群分布，通过电镜可见其表面具有突起和皱褶。

小鼠原代软骨细胞特性

• 软骨细胞位于关节软骨中，负责分泌II型胶原和其他类型的细胞外基质大分子。

• 软骨细胞的增殖和分化与脊椎动物骨架的发育密切相关。

• 软骨细胞能够分泌和响应多种生长因子，包括IGF-1和IL1。

• 体外培养的软骨细胞是研究软骨修复和关节炎病理的重要模型。

• 小鼠软骨细胞分离自软骨组织，软骨组织再生能力强。

• 幼稚的软骨细胞呈椭圆形，体积较小，细胞核浅染，细胞质弱嗜碱性。

• 成熟的软骨细胞多为2-8个成群分布，电镜下可观察到突起和皱褶。

小鼠原代软骨细胞参数表

小鼠原代软骨细胞复苏操作要点

• 将基在37℃水浴锅预热，并在15mL无菌的离心管中加入8mL预热基。

• 将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温，轻轻晃动冻存管，使细胞能在1-2分钟内完全解冻。

• 使用75%酒精进行冻存管的消毒，然后将细胞转移至无菌条件下，并加入新鲜基进行细胞悬液的制备。

• 进行800rpm离心5分钟，弃去上清液，加入新鲜的基，制备细胞悬液。

• 将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，然后放入温箱内。

• 第二天观察细胞贴壁生长情况，进行液体更换以去除死细胞。待细胞长至80-90%汇合时进行正常传代。

小鼠原代软骨细胞传代

• 预热基、PBS并进行75%酒精消毒。

• 吸除或倒掉细胞瓶内旧液，加入少量PBS进行细胞润洗。

• 加入适量胰酶进行消化，37℃孵育，每隔2-3分钟进行一次显微镜下观察，待细胞贴壁间隙变大且细胞趋于圆形但尚未漂起时弃去胰酶并加入新鲜基终止消化。

• 用吸管轻轻吹打贴壁的细胞，制备细胞悬液。

• 将细胞悬液分别接种到另外2-3个细胞瓶内，加入新鲜基，置37℃温箱，隔天观察贴壁生长情况。