小鼠雪旺细胞，又称施万细胞，是一种胶质细胞，主要存在于大脑神经组织中，是周围神经系统的重要组成部分。

雪旺细胞功能非常多样、活跃，除为轴突提供支持外，还分泌多种活性物质，如神经营养因子、细胞外基质及粘附因子等，对维持神经纤维的存活、生长、再生都有意义。

小鼠雪旺细胞的形态和结构十分复杂和多样化：外表面有基膜，能够包裹在神经纤维上，形成髓鞘以保护神经元。小鼠雪旺细胞的核呈长卵圆形，核周有少量胞质，胞膜与基膜相贴形成轴突系膜。

雪旺细胞在神经元生长和连接过程中具有选择性的引导作用：一旦神经元与雪旺细胞接触，神经纤维的延伸将严格限制在Bungner带内。

小鼠雪旺细胞特性

• 雪旺细胞来源于小鼠的正常脑组织，GFAP免疫荧光染色阳性，细胞纯度高于90%，不含有多种病原体和微生物。

• 雪旺细胞通过酶解法制备，阳性表达S-100、GFAP和CD90，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

• 小鼠雪旺氏细胞分离自神经组织，可分为有髓和无髓神经纤维，外表面有基膜，促进神经元存活及轴突再生。

• 雪旺细胞的胞核呈长卵圆形，有基膜和外层胞膜，形成轴突系膜，细胞质构成髓鞘。

• 神经元延伸受限于与雪旺细胞的接触，限制在Bungner带内。

小鼠雪旺细胞参数表

原代小鼠雪旺细胞培养

• 准备培养瓶：使用预涂覆了多聚赖氨酸的培养瓶（T-75培养瓶）。先向瓶内加入10ml无菌水，再加入15μl多聚赖氨酸原液。将培养瓶放入培养箱中，在37°C条件下孵育至少一小时以确保表面充分涂覆。

• 准备培养基：在无菌环境下准备完全培养基，确保添加物已充分混合。用70%酒精消毒培养基和添加物的外部表面，然后放置在无菌地方。

• 处理培养瓶：用无菌水冲洗预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶两次，然后向瓶内加入20ml完全培养基。将培养瓶置于超净台中，准备融化雪旺细胞。

• 融化雪旺细胞：将培养瓶置于37°C水浴中，轻轻地握住并旋转小瓶直到细胞完全融化。立即将小瓶取出，用70%酒精冲洗并放置于无菌环境中。小心打开盖子，使用1ml的eppendorf吸管将细胞悬浮。

• 细胞接种：将悬浮雪旺细胞加入到预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶中，推荐的接种密度应大于10,000个细胞/cm²。

• 培养雪旺细胞：盖上盖子后轻轻摇晃培养瓶，以确保细胞均匀分布。放置于培养箱中，至少16小时内不要移动培养物。第二天更换培养基，并每隔一天更换一次培养基。

• 培养维护：当培养物达到50%融合时，每天更换培养基直至培养物大约达到80%融合。

• 传代培养：当细胞达到90%融合时，需进行传代培养。准备预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶，并用DPBS冲洗细胞。使用胰酶/EDTA消化液孵化细胞，收取细胞并将其移入离心管中。最后，在培养基中重悬细胞并计数，将其接种到新的培养瓶中。

• 安全注意事项：在处理细胞时，应注意潜在的风险。采取适当的保护措施，如戴手套和安全镜，并避免用嘴吸。操作时务必在无菌环境中进行，以确保细胞的纯度和质量。