小鼠脐静脉平滑肌细胞（原代细胞）

来源：脐带组织
细胞特征：贴壁细胞 , 成纤维细胞样
培养基：原代细胞专用培养基
其他：小鼠脐静脉平滑肌细胞在培养过程中可表现出丰富的胞浆和分枝状突起

小鼠脐静脉平滑肌细胞（Mouse Primary Umbilical Vein Smooth Muscle Cells，mPUVSMCs）是一种从小鼠脐带组织中分离得到的重要细胞类型，对心血管疾病的研究具有重要价值。

脐带作为连接胎儿和胎盘的管状结构，其中的脐静脉主要负责将胎盘提供的氧气和营养物质输送至胎儿，而脐动脉则运送胎儿的代谢废物返回胎盘。由于脐带是分娩后的废弃组织，其获取方便且无伦理争议，结合成熟的分离技术，脐静脉平滑肌细胞广泛应用于血管相关研究。脐静脉平滑肌细胞在培养早期具有贴壁生长能力，形态多样，包括梭形、不规则形、三角形或扇形，细胞核通常为卵圆形并居中。培养3天后开始贴壁伸展，约2周后细胞汇合，呈现长梭形态，胞质丰富，有分枝状突起，低密度时细胞交织成网状，高密度时则排列成旋涡状或栅栏状，传代后细胞生长迅速并保持典型形态学特征。脐静脉平滑肌细胞在调节血管收缩、舒张及修复方面发挥关键作用，是研究动脉硬化、高血压等疾病机制的重要模型，亦在药物筛选和再生医学领域具有广泛应用潜力。

小鼠脐静脉平滑肌细胞特性特征

标志性蛋白：脐静脉平滑肌细胞表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白和组织因子等平滑肌特异性标志物。
表面标志物：常见的表面标志物包括CD10、CD13、CD44、CD73和CD90，而不表达CD31、CD34或CD45。
基因表达：脐静脉平滑肌细胞在培养中能自我更新和扩增，并且具有向血管平滑肌、周细胞或血管内皮表型的分化潜能。其基因表达谱显示出与平滑肌功能相关的基因活跃

小鼠脐静脉平滑肌细胞参数表

细胞名称	小鼠脐静脉平滑肌细胞（原代细胞）（mPUVSMC）
英文名称	Mouse Umbilical Vein Smooth Muscle Cells
组织来源	小鼠脐带组织
细胞类型	平滑肌细胞
细胞形态	梭形、不规则形、三角形或扇形
细胞核特征	卵圆形，居中
纯度	高于90%
病原体检测	不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养基	原代细胞专用培养基
CO₂浓度	5%
培养温度	37℃
传代比例	1:3至1:5
换液频率	每2-3天更换一次
融合度要求	达到80%-90%时进行传代
胰蛋白酶浓度	0.13%
消化时间	1-2分钟
冻存液成分	10% DMSO和90%胎牛血清（FBS）
冻存过程	-4℃静置1小时，-20℃冷冻1小时，液氮中保存
表达标志物	α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、CD10、CD13、CD44等
生长潜力	在培养中可增殖40倍以上
分化潜能	可分化为骨骼肌、血管平滑肌、周细胞或血管内皮细胞
应用领域	心血管疾病研究、药物筛选、再生医学等
注意事项	建议用多聚赖氨酸 PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）对接种培养皿包被处理

培养教程

原代细胞小鼠脐静脉平滑肌细胞培养教程

细胞复苏

从液氮中取出脐静脉平滑肌细胞冻存管，迅速放入37℃水浴中，轻轻摇晃加速解冻。
解冻后，立即将细胞悬液转移至含10%胎牛血清（FBS）和2%青霉素-链霉素的培养基中，以终止冻存液作用，确保脐静脉平滑肌细胞的生存率。
将细胞悬液转移至离心管，以1000 rpm离心5分钟，去除冻存液残留。
弃去上清液，加入适量培养基重悬脐静脉平滑肌细胞。
将重悬的脐静脉平滑肌细胞均匀接种至预先用1%明胶包被的培养瓶中。
将培养瓶放置于37℃、5% CO₂培养箱中静置24小时，确保脐静脉平滑肌细胞贴壁稳定。

细胞传代

观察脐静脉平滑肌细胞的生长状态，待细胞融合度达到80%-90%时进行传代。
用无钙镁PBS清洗培养瓶2次，去除残留培养基，避免影响脐静脉平滑肌细胞的后续消化效果。
加入0.125%胰蛋白酶-EDTA消化液，覆盖细胞表面后放入37℃ CO₂培养箱中消化1-2分钟。
观察显微镜下，当脐静脉平滑肌细胞变圆并脱壁时，立即加入含20% FBS的培养基终止消化。
用移液器轻轻吹打瓶底，制备单细胞悬液，确保脐静脉平滑肌细胞均匀分散。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液后，加入新鲜培养基重悬脐静脉平滑肌细胞。
按1:3至1:5比例将脐静脉平滑肌细胞接种至新培养瓶中。
将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中，继续培养，并定期更换培养基以维持脐静脉平滑肌细胞的最佳状态。

细胞冻存

配制冻存液，使用90% FBS和10% DMSO的混合液，以最大限度保护脐静脉平滑肌细胞的活性。
在传代前24小时更换培养基以优化脐静脉平滑肌细胞的活性。
收集生长良好的脐静脉平滑肌细胞，胰酶消化后制备单细胞悬液。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液后，按每5×10⁶/mL浓度将脐静脉平滑肌细胞重悬于冻存液中。
将装有脐静脉平滑肌细胞的冻存管静置于4℃环境1小时后，转移至-20℃冷冻1小时，再置于液氮表面冷却2小时。
最后，将冻存管浸入液氮中长期保存，确保脐静脉平滑肌细胞的长期存储稳定性。