小鼠外周血中性粒细胞分离自外周血，外周血指骨髓外的血液。通过临床方法释放骨髓中的造血干细胞到血液中，再分离提取，这些干细胞称为外周血干细胞，生命方舟计划首次提出了这一概念。

中性粒细胞在瑞氏染色的血涂片中，胞质无色或淡红色，具有细小颗粒（0.2～0.4微米）。细胞核为杆状或2至5分叶状，具趋化、吞噬和杀菌作用。

中性粒细胞来源于骨髓，胞浆内含溶酶体（髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性水解酶）。在非特异性免疫中起重要作用，抵御微生物病原体，尤其是化脓性细菌。它们能吞噬细菌、衰老红细胞、抗原-抗体复合物和坏死细胞。吞噬大量细菌后，中性粒细胞解体，释放溶酶体酶，形成脓液。

中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞之一，体外培养12至24小时内活性稳定，48小时后活性下降，96小时基本死亡。

外周血中性粒细胞概念介绍特性

• 小鼠外周血中性粒细胞分离自外周血。

• 外周血指骨髓外的血液，通过方法释放骨髓造血干细胞到血液中，然后分离提取。

• 瑞氏染色：胞质无色或淡红色，有细小颗粒。

• 细胞核：杆状或2-5分叶，叶间有细丝相连。

• 功能：趋化、吞噬、杀菌作用。

• 来源于骨髓，含溶酶体（髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性水解酶）

外周血中性粒细胞参数表

小鼠外周血中性粒细胞获取与培养

来源与分离方法

• 来源：小鼠外周血、骨髓

• 分离方法：利用改进的密度梯度离心法，使用Histopaque 1077和Histopaque 1119，从骨髓中高效分离出中性粒细胞。

材料与试剂

• 动物：C57BL/6小鼠

• 培养基：10% FBS的1640培养基

• 其他：酒精、生理盐水、PBS、70 μm细胞过滤器、细胞培养板

培养步骤

• 小鼠处理：酒精消毒小鼠，收集股骨和胫骨，去除肌肉组织。

• 骨髓收集：收集骨髓置于预冷的培养基中。

• 骨髓处理：冲洗、过滤骨髓，离心，弃去上清。

• 密度梯度离心：使用Histopaque 1077和Histopaque 1119进行离心分层。

• 细胞收集：吸取中间层液体，离心、弃上清，重悬细胞。

• 细胞培养：将细胞培养于细胞培养板中。

注意事项

• 无菌操作：器械消毒，液体过滤。

• 冲洗骨髓腔：确保彻底冲洗骨髓腔。

• 细胞收集：吸取云雾状液体，重悬细胞。