小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）源自小鼠胚胎组织，是疏松结缔组织的主要细胞成分。小鼠胚胎成纤维细胞呈现出较大的细胞核和突起的纺锤形或星形的扁平状结构。其功能活跃，具有明显的蛋白质合成和分泌活动，对组织修复具有重要作用。

小鼠胚胎成纤维细胞能够在培养基中快速生长并表现出多种形态，被广泛应用于胚胎干细胞的培养中，作为饲养层细胞，能够产生有利于维持干细胞未分化状态和促进其增殖的因子。经处理的胚胎成纤维细胞细胞还可以用于制备培养基，支持多能性干细胞的生长。

小鼠胚胎成纤维细胞特性

• 小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）来源于小鼠胚胎，是疏松结缔组织的主要细胞成分。

• MEF细胞具有明显的形态特征，包括较大的细胞核和突起的纺锤形或星形的扁平状结构。

• 小鼠胚胎成纤维细胞在培养基中生长迅速，具有较强的细胞增殖和分泌活动。

• MEF细胞在组织修复中扮演重要角色，能够转化为纤维细胞并参与细胞变性、坏死和组织缺损的修复。

• MEF细胞常被用作胚胎干细胞（ES细胞）培养的饲养层细胞，能产生促进ES细胞增殖并维持其未分化特性的因子。

• 经处理的MEF细胞可用于制备有用的培养基，支持多能性干细胞的自由生长。

• ScienCell 实验室的MEF细胞来源于新生13天的小鼠胚胎组织，质量经过免疫荧光鉴定，不含有害微生物。

小鼠胚胎成纤维细胞参数表

小鼠胚胎成纤维细胞培养

• 采集怀孕14-15天的小鼠胚胎组织，进行无菌处理并置于含有75%酒精的容器中浸泡2-3分钟。

• 在超净台上，剖开小鼠腹部，取出子宫，并在装有PBS（含双抗）的培养皿中冲洗子宫，使用眼科剪和眼科镊子进行操作。

• 将子宫放入新的无菌培养皿中，切开子宫以暴露胎鼠，去除胎膜，然后剔除胎鼠的头部、四肢和内脏，得到鼠胚躯干。

• 将鼠胚躯干转移到含有PBS的新的无菌培养皿中，用含双抗的PBS洗涤至无血色。

• 将鼠胚躯干转移到含有预冷DMEM培养基的培养皿中，剪碎至肉糜状，加入0.25%胰酶，置于37℃细胞培养箱消化15-20分钟。

• 加入含有10%胎牛血清的DMEM培养基终止消化。

• 将细胞悬液过筛并收集，离心去除上清，重新加入含有10%胎牛血清的DMEM培养基，制成细胞悬液。

• 将细胞悬液接种到预先用多聚赖氨酸包被的培养瓶中或培养皿中，于37℃、5% CO2培养箱中孵育。

• 4-6小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养液。

注意事项：

• 所有操作必须在无菌条件下进行，特别是涉及到子宫和胚胎的操作。

• 消化时间要控制好，切勿过度消化。

• 在过筛过程中，注意使细胞悬液减至肉糜状，以便过滤。

• 细胞在培养箱中的温度、湿度和CO2浓度要保持稳定。

• 培养过程中要定期观察细胞形态，并及时更换培养基。