小鼠气管上皮细胞源自气管组织，这是呼吸系统中一部分。气管上皮细胞的主要功能是清除吸入气体中的灰尘颗粒，从而净化呼吸气体。气管上皮不仅是气道与外界环境的第一道防线，还参与调节气道炎症和免疫反应，起到保护作用。

气管上皮细胞特性

• 气管是呼吸器官的一部分，由14-16个半环状软骨构成，软骨形成"C"字形的环状结构，软骨间通过韧带连接。

• 气管上皮细胞构成气管的表面覆盖层，主要由纤毛上皮细胞组成，具有净化呼吸气体的功能，帮助清除吸入的灰尘颗粒。

• 气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线，具有保护作用，参与气道炎症及免疫反应。

• 小鼠气管上皮细胞可用于体外培养，与体内组织相似性大，在基础及临床研究中具有重要价值。

小鼠气管上皮细胞参数表

小鼠气管上皮细胞培养

细胞培养

• 取出25cm²培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

• 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

细胞传代

• 吸出25cm²培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴3分钟左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化。

• 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例进行接种传代，补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO₂培养箱中培养。

• 待细胞完全贴壁后，培养观察。每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

注意事项

• 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

• 细胞培养过程中，注意保持无菌操作。

• 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

• 建议收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

• 若细胞因运输等问题导致状态不稳定或污染，请及时联系技术支持，详尽告知具体情况，便于跟踪解决。

• 该细胞仅可用于科研。

气液相界面培养

• 调整细胞密度后，以7.5×10⁴/cm²接种至预先铺有胎盘胶原的Millicell小室中，同时下室也加入含有5%FBS小鼠气管生长培养基，置37℃、5%CO₂培养箱中培养24小时。

• 24小时后更换无血清的小鼠气管生长培养基继续培养。每隔2天换液1次，直到用Millicell-ERS阻力系统测细胞跨膜压差>1000Ω·cm²。

• 去掉上室的培养基，建立气液相界面培养。下室继续加小鼠气管生长培养基培养，每隔2天换液1次。气液相界面培养第10-15天的细胞用于实验。