小鼠支气管上皮细胞来源于小鼠的支气管组织，是气道与外界环境接触的第一道防线。

小鼠支气管上皮细胞特征

• 分离自小鼠支气管组织。

• 支气管是气管分出的一级支气管，左右主支气管存在形态差异。

• 支气管上皮作为气道与外界环境的第一道防线，参与气道炎症和免疫反应，在多种呼吸道疾病的发病机制中起重要作用。

• 体外培养的原代支气管上皮细胞与体内组织相似，对基础和临床研究重要。

小鼠支气管上皮细胞参数表

小鼠支气管上皮细胞培养

细胞复苏

• 从液氮中取出细胞，快速放入37°C水浴中解冻。

• 轻轻摇动冻存管，直至细胞完全解冻（约1-2分钟）。

• 用70%酒精擦拭冻存管外部，并在无菌条件下操作。

• 将上皮细胞悬液转移至含有预热培养基的离心管中，800 rpm离心5分钟。

• 弃上清，用适量培养基重悬细胞，接种于包被鼠尾胶原的T25培养瓶中。

细胞培养

• 将支气管上皮细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

• 每2-3天更换一次培养基，直至细胞达到80-90%融合。

细胞传代

• 去除旧培养基，用PBS冲洗细胞。

• 加入0.25%胰蛋白酶，37°C消化约1-2分钟。

• 轻敲培养瓶，使细胞脱落，加入适量培养基终止消化。

• 800 rpm离心5分钟，弃上清，用培养基重悬细胞。

• 按1:2比例进行传代培养。

细胞冻存

• 上皮细胞达到80-90%融合时，进行传代操作。

• 将支气管细胞悬液分装入冻存管中，每管1ml。

• 冻存管放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱中过夜。

• 第二天转移至液氮中长期保存。