小鼠输尿管上皮细胞源自小鼠输尿管组织，输尿管是一对细长的管道，位于腹膜后，呈扁圆柱状，沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管上皮细胞经过广谱角蛋白（PCK）免疫荧光鉴定，纯度高于90%，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等，贴壁生长，适用于尿路上皮肿瘤、输尿管损伤等研究领域。

输尿管的位置和结构特点

• 输尿管分为上、中、下三段，分别位于肾盂与输尿管移行处、小骨盆入口处和膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口处

• 输尿管管壁分为黏膜层、固有层、肌层、外膜，黏膜层表面为移行上皮，约有4-5层细胞

• 输尿管—膀胱连接处有瓦耳代尔鞘结构，能防止膀胱内尿液返流到输尿管

小鼠输尿管上皮细胞参数表

小鼠输尿管上皮细胞培养操作指南

准备

• 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态。

细胞传代

• 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个底部，吸出多余液体，37℃温浴1-3分钟。观察细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化。

• 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行传代接种，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

• 待细胞贴壁后，观察并每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

细胞收货脱落

• 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5分钟，保留沉淀。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3分钟(或4℃冰箱静置5-7分钟)；消化完毕后，向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。

• 经1000rpm，离心5分钟，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。

• 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

注意事项

• 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

• 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

• 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。