小鼠真皮微血管内皮细胞源自小鼠真皮组织。

真皮是皮肤中位于表皮深层的重要组织，与皮下组织相连。其由乳头层和网状层组成，内含丰富的结缔组织细胞以及胶原蛋白和弹性纤维，赋予皮肤弹性和韧性。微血管内皮细胞在真皮中尤其在炎症反应、肿瘤生长和创面愈合中发挥重要作用。

真皮资料相关

• 真皮是位于皮肤深层的组织，由乳头层和网状层构成，胶原蛋白和弹性纤维是其主要组成成分。

• 结缔组织细胞和大量胶原纤维弹性纤维使真皮具有弹性和韧性，是皮肤结构的重要支撑。

• 真皮微血管内皮细胞在炎症反应、肿瘤生长和创面愈合中发挥关键作用，对维持组织健康至关重要。

小鼠真皮微血管内皮细胞参数表

小鼠真皮微血管内皮细胞培养步骤

• 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

贴壁细胞消化

• 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

• 添加1mL 0.25%胰蛋白酶消化液至T25培养瓶中，轻轻转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3分钟。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5mL完全培养基终止消化。

• 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例（1:2）接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

细胞实验

• 因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）、多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml）、明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项

• 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

• 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

• 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。