小鼠肝窦内皮细胞（原代细胞）

原代小鼠肝窦内皮细胞（LSECs）分离自小鼠肝脏组织。

肝窦内皮细胞是肝脏内数量最多的非实质细胞，约占肝非实质细胞总数的70%。它们位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈和免疫耐受等功能。由于拥有窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜，肝窦内皮细胞具有高度通透性，能够快速交换各种大小分子的物质。

在肝脏遭受病原侵袭时，肝窦内皮细胞的窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。肝窦毛细血管化由多种因素引起，过程极为复杂，常见于多种肝病的发病前期阶段。

肝窦内皮细胞在表型和功能上与普通毛细血管内皮细胞有较大差异。它们之间缺乏细胞间连接，细胞下基底膜物质很少，导致窦内皮通透性较高，有利于物质交换。不同于肝细胞的自我复制，新生的肝窦内皮细胞主要来自肝内外其他细胞成分的分化替代。不少研究证实，肝再生时的肝窦内皮细胞具有骨髓源性替代，内皮祖细胞是参与这一过程的主要细胞成分。

窗孔是肝窦内皮细胞最具特征性的结构，其大小从小于10纳米至1～2微米不等。由于窗孔的存在和缺乏内皮下完整基膜的结构，肝窦壁是全身唯一缺乏基膜的毛细血管。除窦内的血细胞外，血浆成分均能从窗孔进入Disse间隙进行物质交换。

肝窦内皮细胞特性

是肝脏内数量最多的非实质细胞，占70%。
位于肝窦腔与肝细胞之间。
功能：物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受。
具有窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜，导致高度通透性。
肝窦内皮细胞窗孔减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构。
由多种因素引起，复杂，常见于多种肝病发病前期。

原代小鼠肝窦内皮细胞参数表

产品名称	原代小鼠肝窦内皮细胞
来源	分离自正常小鼠肝脏组织
主要功能	物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受
位置	位于肝窦腔与肝细胞之间
结构特性	窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜，高度通透性
窗孔大小	从＜10nm至1～2μm不等
物质交换方式	由于窗孔存在和缺乏内皮下完整基膜，血浆成分通过窗孔进入Disse间隙交换物质
肝窦毛细血管化	窗孔减少或消失，内皮下基膜形成，类似于连续型毛细血管的结构
肝窦毛细血管化成因	多种因素引起，过程复杂，常见于多种肝病的发病前期阶段
病理变化	在多种病原侵袭下，肝窦内皮细胞窗孔减少或消失，形成内皮下基膜，类似连续型毛细血管结构，这一过程称为肝窦毛细血管化
研究关注点	肝窦毛细血管化在多种肝病的发病前期阶段中出现，近年来受到广泛关注
培养基	含FBS、生长添加剂、青霉素和链霉素
包被条件	PLL（0.1mg/ml）、明胶（0.1%）
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养环境	气相：空气95%，CO2 5%；温度：37°C；培养箱湿度：70%-80%
细胞特性与鉴定	形态：内皮细胞样、上皮样、多角形细胞、贴壁生长；vWF免疫荧光染色阳性，纯度高于90%；不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
冻存液	90% FBS，10% DMSO

培养教程

原代小鼠肝窦内皮细胞培养方法

培养基

培养基类型：Hams/F12
添加因子：10% FBS、VEGF、Insulin、Dexamethasone、Selenium、Transferrin、Penicillin、Streptomycin 等

使用方法

取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或过夜，以稳定细胞状态。
当细胞达到80%汇合时，准备进行传代培养。

细胞传代

吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3分钟左右；观察细胞回缩变圆后吸除消化液，再加入完全培养液终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养。
待细胞完全贴壁后，进行培养观察。每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

注意事项

培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
在细胞培养过程中，保持无菌操作。
传代培养过程中，注意胰酶消化时间不宜过长，以免影响细胞贴壁及其生长状态。
该细胞只可用于科研目的。