大鼠大脑皮层神经元细胞和大鼠皮层神经元细胞均来源于大鼠神经元组织。
大鼠大脑皮层神经元细胞位于脑、脊髓和神经节中，突起则延伸至全身各器官和组织。

大鼠大脑皮层神经元细胞及相关特性

• 神经元是神经系统结构和功能的基本单位，具有长突触（轴突）。

• 神经元由细胞体和细胞突起构成，突起包括树突和轴突。

• 细胞体位于脑、脊髓和神经节中，突起可延伸至全身各器官和组织中。

• 细胞体含核，直径约4-120微米，核大而圆，核仁明显。

• 神经元突起可接受和传递兴奋，参与神经系统调节和疾病的病理过程。

• 皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一，形态学上通过观察突起增多、形成网状，细胞最丰满时突起减少，细胞开始裂解等。

大鼠大脑皮层神经元细胞参数表

细胞名称	大鼠大脑皮层神经元细胞（原代细胞）
组织来源	脑组织
种属来源	大鼠
形态学观察	神经元从贴壁、伸出突起开始；突起逐渐增多，并逐渐成网，细胞胞体增大，周边光晕明显。10-12天细胞最为丰满，随后神经元开始裂解，突起逐渐减少，细胞退化变性，轮廓模糊，光晕消失，细胞变形
包被条件	PLL (0.1 mg/ml)
培养基	含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
细胞形态	神经元细胞样
传代特性	终末分化细胞，不增殖
传代比例	不传代
消化液	0.125% 胰蛋白酶
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%
实验方法	机械性划割培养，酶消化法
实验方法原理	SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7天后，使用微量移液器塑料滴头在培养孔内进行机械性划割，根据划割程度分为轻、中、重三组。不同时间点（10，30分钟，1，3，6，12，24小时）检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶（LDH）含量
应用领域	获得大鼠大脑皮层神经元细胞，用于神经元细胞定向分化研究，用于神经元细胞凋亡研究
推荐培养基	大鼠皮层神经元细胞专用完全培养基
Gibco大鼠原代皮质神经元	从大鼠第18天胚胎中分离得到并冷冻保存，每瓶含有1百万个细胞/mL，解冻后的存活率在50-80%之间，具有高神经元纯度，是新鲜神经元的优质替代品

大鼠大脑皮层神经元细胞培养

取材和准备

• 以75%酒精消毒孕16天的SD大鼠腹部皮肤。

• 在无菌条件下取出胚胎，将大脑皮层放入预冷的D-Hanks’平衡盐液中。

组织处理

• 在解剖显微镜下分离和去除胚胎大脑皮层。

• 将皮层剪成约1mm³大小的碎片，加入胰酶-EDTA消化液，37℃孵化20分钟。

细胞收集

• 用滴管吸出组织并转移到预冷的培养液中终止消化。

• 将组织转移到含有预冷DMEM＋10%FBS的离心管中，吹打数次后静置，收集上清液。

细胞处理

• 经过筛网过滤后的细胞悬液离心，弃上清，用DMEM＋20%FBS培养液吹打成单细胞悬液。

细胞接种

• 计数细胞，调整密度后种入培养皿中，放入CO2孵箱中培养。

• 培养48小时后，添加Ara-C使其终浓度为1×10-5 mM/L，继续培养。

注意事项

• 实验步骤可以根据需求进行调整，如消化时间、消化液成分等。

• 此方法适用于大鼠和小鼠的皮层神经元细胞培养，但小鼠应选择孕13天左右的胚胎。

• 注意细胞接种时的密度，神经元细胞生长需要足够的密度支持。

• 在玻片上培养时，选择合适来源和处理方法的玻片非常重要，对细胞生长有重要影响。

• 如果有B27和neurobasal培养基，可以简化培养步骤，无需添加Ara-C。