原代大鼠外周血中性粒细胞是从大鼠外周血中分离出的细胞，通过密度梯度离心法获得，是白细胞中的一类，在免疫系统中扮演着关键角色。外周血中性粒细胞具有趋化、吞噬和杀菌等重要功能，能够迁移至感染或损伤部位，并吞噬和消化病原体和细胞碎片。

大鼠外周血中性粒细胞在瑞氏染色血涂片中呈现：胞质呈无色或淡红色，含有许多细小的颗粒；细胞核呈杆状或分叶状。

大鼠外周血中性粒细胞特征

• 大鼠外周血中性粒细胞来源于大鼠的外周血，通过密度梯度离心法从外周血中分离得到。

• 中性粒细胞是白细胞中的一类，主要通过趋化、吞噬和杀菌等机制参与免疫反应。

• 中性粒细胞胞质呈无色或极浅的淡红色，含有许多细小的浅红或浅紫色颗粒，细胞核呈杆状或分叶状。

• 中性粒细胞具有趋化作用，可以迁移至感染或损伤部位；具有吞噬作用，能够吞噬并消化病原体和细胞碎片；具有杀菌作用，通过溶酶体酶分解吞噬的病原体和组织碎片。

• 大鼠外周血中性粒细胞应用在研究免疫反应、药物筛选、疾病模型和细胞生物学等方面。

• 在临床上，外周血是指除骨髓之外的循环血液，通过某些方法可将骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再从血液中提取分离得到造血干细胞，称为外周血干细胞。

• 中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。

大鼠外周血中性粒细胞参数表

大鼠外周血中性粒细胞处理

• 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，并用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。

• 进行离心（1200-1500rpm，3分钟），弃去上清，收集细胞沉淀。

• 向细胞沉淀中加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。调整合适密度的细胞接种至培养器皿中，置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

• 若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散，可添加0.25%胰蛋白酶消化液2ml，37℃温浴2-3分钟后终止消化，进行细胞分散。

• 细胞状态稳定后，进行培养观察。按照换液频率每2-3天更换新鲜的完全培养基。

大鼠外周血中性粒细胞传代

• 当细胞达到80%汇合时，准备进行传代培养。

• 用PBS清洗细胞一次，添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至培养瓶中，37℃温浴1-3分钟后终止消化。

• 吹打混匀后按1:2-1:3适当的比例进行细胞传代接种，补充新鲜的完全培养基至5ml，置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

• 待细胞完全贴壁后，进行培养观察，每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

注意事项

• 培养基于4℃条件下可保存3-6个月，保持无菌操作。

• 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，避免影响细胞贴壁及生长状态。