大鼠支气管上皮细胞是从大鼠的支气管组织中分离出上皮细胞，利用特定的酶解和分离技术提取细胞而获取。

大鼠支气管上皮细胞具有贴壁生长特性，呈铺路石状或不规则形态。

大鼠支气管细胞及其特征

• 支气管上皮细胞的组成：由纤毛、无纤毛和能分泌黏液的细胞组成。

• 主要功能：形成物理屏障，防止有毒物质侵入；产生和分泌化学介质和细胞因子，构建宿主防御系统。

• 细胞构成：基细胞、杯状细胞和纤毛细胞，形成基底柱状结构，并清除黏液纤毛。

• 生理变化：包括支气管炎、支气管扩张和支气管癌。

• 气管结构：包括软骨、肌肉、结缔组织和黏膜构成，气管软骨为"C"字形。

• 细胞特性：组织来源于正常气管组织；通过广谱角蛋白免疫荧光染色鉴定；细胞纯度高于90%；不含有多种病原体和细菌；细胞生长方式为铺路石状、不规则细胞，贴壁培养。

大鼠支气管上皮细胞参数表

大鼠支气管上皮细胞培养

传代步骤

• 当细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，在37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 观察细胞消化情况，待大部分细胞变圆并脱落时，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入少量培养基终止消化。

• 补加6-8ml/瓶的培养基，轻轻打匀后吸出，进行1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液。

• 补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤

• 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。

• 将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜，或者加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜。

• 第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤

• 当细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

• 弃去培养基后，用PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，待细胞变圆脱落后加入2ml完全培养基终止消化。

• 使用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%，按每1ml的数量分配到冻存管中，置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时后转入液氮灌储存。