大鼠气管上皮细胞是从大鼠气管组织中分离。大鼠气管是一种重要的呼吸器官组织，属于呼吸道系统的一部分。在体外培养的过程中，大鼠气管上皮细胞能够维持其形态结构和功能活动的相似性，与体内组织具有很高的相似性。

气管上皮细胞相关特性

• 气管是呼吸器官的一部分，由软骨、肌肉、结缔组织和粘膜构成。

• 气管上皮细胞是气道与外界环境接触的第一道防线，参与气道炎症及免疫反应。

• 气管上皮细胞可分泌粘液，纤毛上皮细胞通过纤毛运动将粘液与灰尘排出，起到净化空气的作用。

• 在气管中，近端下呼吸道的上皮表面主要是纤毛上皮细胞，而远端下呼吸道则主要由Clara细胞和基底细胞组成。

大鼠气管上皮细胞参数表

细胞名称	大鼠气管上皮细胞(原代细胞)
细胞类型	气管上皮细胞
来源	大鼠正常气管组织
气管功能	作为气道与外界环境接触的第一道防线 参与气道炎症及免疫反应  分泌粘液，纤毛运动将粘液与吸入的灰尘排出，清洁呼吸空气
细胞鉴定	广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性
细胞纯度	高于90%
污染检测	不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞生长方式	铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养
培养基	原代上皮细胞专用培养基
传代方法	约80-90%的密度传代
培养条件	温度：37°C - 湿度：5% CO2的培养箱中
应用	基础研究和临床研究中极为重要，用于理解气道生理和病理过程，探索呼吸系统疾病治疗新方法，评估药物毒性和有效性

大鼠气管上皮细胞培养操作步骤

细胞稳定

• 取出25cm²培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

细胞传代

• 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

传代操作

• 吸出25cm²培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴3分钟左右；在倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化。

• 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养。

• 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

细胞状态观察

• 观察大鼠正常气管上皮细胞；检查培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，拍照并及时与技术支持联系。

• 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，在显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

• 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

• 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

贴壁细胞操作

• 若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达到80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。