大鼠视网膜色素上皮细胞来源于大鼠视网膜。
视网膜色素上皮细胞位于眼球内部，负责离子、水、营养物质和代谢产物的转运。
视网膜色素上皮细胞在视黄醇循环中有重要作用，同时也清除脱落的光感受器细胞外节，并分泌多种生长因子，维持眼部组织的结构完整。

视网膜色素上皮细胞特性

• 视网膜色素上皮细胞位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的转运通道。

• 视网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节，分泌多种生长因子。

• 视网膜色素上皮细胞无再生能力，死亡后不被替换。

• 视网膜色素上皮的退化可能引发视觉障碍。

视网膜色素上皮细胞参数表

大鼠视网膜色素上皮细胞培养操作

细胞复苏

• 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速摇晃解冻，然后加入4 mL培养基混合均匀。

• 在1000 rpm条件下离心3分钟，弃去上清液，加入1-2 mL培养基后吹匀。

• 将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜，或者加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜。

• 第二天进行液体更换并检查细胞密度。

细胞传代

• 当细胞密度达到80%-90%时，可进行传代培养。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，37℃培养箱中消化1分钟。

• 观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速终止消化。

• 补加培养基，离心，弃去上清液，加入培养液后吹匀。

• 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存

• 收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，离心，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

• 加入无血清细胞冻存液，使细胞密度为5×10^6~1×10^7/mL，混匀后装入冻存管，放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮灌储存。

注意事项

• 操作过程中保持无菌操作，以确保细胞培养的成功。

• 使用培养基和消化液时，注意温度和PH值的控制，避免对细胞产生不良影响。

• 细胞冻存时，注意使用冻存液以及冻存管的标识，确保细胞的保存和追溯。

• 在培养过程中，定期观察细胞形态和生长情况，及时进行液体更换和细胞传代，以维持细胞的健康状态。