大鼠卵巢上皮细胞源自卵巢组织，位于卵巢的表面，覆盖在卵巢表面上，形成卵巢的外层组织。

大鼠卵巢上皮细胞特征

• 大鼠卵巢上皮细胞分离自卵巢组织。

• 卵巢上皮细胞具有两项主要功能：分泌激素，促进卵细胞的成熟；分泌炎症介质，参与炎症反应。

• 卵巢上皮细胞：呈扁平形状，覆盖在卵巢表面，形成一层上皮组织，通常没有明显的胞浆突起。

大鼠卵巢上皮细胞参数表

大鼠卵巢上皮细胞培养操作流程

细胞接收和预处理

• 将T25细胞培养瓶从存储中取出，并用75%酒精消毒瓶身。

• 将细胞培养瓶放入37°C、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态。

细胞贴壁

• 吸出培养基，用PBS清洗细胞一次。

• 向T25培养瓶中加入0.25%胰蛋白酶消化液，37°C温浴1-3分钟，直至细胞回缩变圆。

• 加入5ml完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

• 按传代比例接种细胞，补充新鲜的完全培养基至5ml。

• 置于37°C、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

细胞传代

• 当细胞密度达到80%-90%时，进行传代培养。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入胰蛋白酶消化液，37°C培养箱中消化1-2分钟，观察细胞消化情况。

• 补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加培养液后吹匀。

• 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

细胞冻存

• 当细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

• 弃去培养基后，用PBS清洗瓶底1-2次后加入胰酶。

• 细胞脱落后，加入完全培养基终止消化，使用血球计数板计数。

• 离心5分钟去掉上清，用血清重悬浮，加入DMSO至最终浓度为10%。

• 按每1ml的数量分配到冻存管中，置于-80°C冰箱，至少2小时后转入液氮灌储存。

注意事项

• 培养基于4°C条件下可保存3-6个月。

• 在细胞培养过程中，注意保持无菌操作。

• 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

• 建议在收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于沟通和技术支持。