人脐带间充质干细胞（MSC）是一种具有多向分化潜能的干细胞，来源于健康足月分娩孕妇的脐带。MSC细胞具有强大的增殖能力，可分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞，在低血清条件下可维持生长。

脐带是连接胎儿和胎盘的管状结构，含有丰富的干细胞资源，其中的间充质干细胞被提取自脐带华通氏胶，具有低免疫原性、高纯度且不含病原体。MSC存在于多种成体组织中，具有促进造血干细胞增殖与分化、免疫调节、抗炎和组织修复等功能。

MSC细胞标志物包括CD44、CD105、SH2和SH3，有助于鉴定MSC。

HuMSC人脐带间充质干细胞特性

• 人脐带间充质干细胞（MSC）具有多向分化潜能，可分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞，且具有强大的增殖能力。

• 脐带间充质干细胞取自健康足月分娩孕妇的脐带，具有自我更新能力。

• MSC具有低免疫原性、高纯度和无病原体的特点。

• MSC可应用于组织工程、细胞治疗和基因治疗，主要用于风湿免疫疾病的治疗。

• MSC存在于多种成体组织中，具有促进造血干细胞增殖与分化、免疫调节、抗炎和组织修复等作用。

• 细胞培养条件对MSC的分化潜能和功能有重要影响，适宜的培养条件可以促进其分化成不同细胞类型。

• MSC的标志物包括CD44、CD105、SH2和SH3，这些标志物有助于鉴定MSC。

• MSC可在适宜的条件下分化成脂肪、骨和软骨细胞，并在低血清条件下维持生长。

MSC人脐带间充质干细胞参数表

名称	人脐带间充质干细胞（HUMSC）
来源	健康足月分娩孕妇的脐带
分化能力	能分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞
组织来源	脐带华通氏胶（位于脐带血管和外膜之间）
细胞类型	成体干细胞
细胞形态	间充质干细胞
自我更新能力	强
免疫原性	低
纯度	高于90%
病原体检测	不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
功能	促进造血干细胞增殖与分化、免疫调节、抗炎和组织修复等
标志物	CD44、CD105、SH2和SH3
培养条件	适宜的培养条件可以促进其分化成不同细胞类型，维持生长在低血清条件下； 适用于Mesenchymal Stem Cell Basal Medium， 当添加Mesenchymal Stem Cell Growth Kit for Adipose and Umbilical-derived MSCs - Low serum (ATCC PCS-500-040)时， 可在低血清（2% FBS）条件下培养
应用领域	组织工程、细胞治疗、基因治疗，尤其在风湿免疫疾病治疗中有显著效果
增殖能力	强大的增殖能力，可以快速繁殖
血清含量	2-10% FBS
适用基质	Mesenchymal Stem Cell Basal Medium
质量保证	经过鉴定，细胞纯度高于90%；经过检测，不含有病原体
其他特性	多功能干细胞，可分化成多种细胞类 脐带是哺乳动物胎儿与胎盘相连接的管状结构，在其中包含了丰富的干细胞资源 脐带间充质干细胞被提取自脐带华通氏胶，这是一种位于血管和外膜之间的胶状物 可通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞 分化潜能使其具备在组织修复等方面发挥积极作用

人脐带间充质干细胞(MSC)培养教程

实验材料准备

• 试剂：完全培养基、消化液、PBS、冻存液

• 耗材：50ml离心管、10ml移液管、1000ul枪头、200ul枪头、T25培养瓶、眼科手术剪、镊子

• 仪器设备：离心机、超净工作台、细胞计数仪、电子移液器、手动移液器

细胞处理步骤

培养基及培养冻存条件准备

• 配制完全培养基。

• 培养条件: 气相-空气, 95%；二氧化碳, 5%。 温度: 37摄氏度，湿度70%-80%。

• 冻存液，液氮储存。

细胞处理

• 复苏细胞

• 在37℃水浴中迅速摇晃解冻含有1mL细胞悬液的冻存管。

• 加入4-9mL培养基混合均匀后，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加培养基后吹匀。

• 将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。

  
  

• 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

• 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

细胞分离培养

• 样本采集及预处理

• 取脐带组织置于生理盐水中清洗血液。

• 将清洗干净的脐带组织放置于无菌培养皿中，剪成2-3cm的小段。

• 清洗脐带小段，挤压脐带，挤出脐带内部残留血液，将清洗干净后的脐带小段浸泡于含有1%P/S的PBS中备用。

• 沿纵向剪开脐带，清洗剖开脐带内部的血迹。

• 用镊子夹紧脐带内部表层的华氏通胶，轻轻撕下华氏通胶组织块，浸泡于PBS中备用。

  
  

• 人脐带间充质干细胞分离培养

• 将华氏通胶组织加入T75培养瓶中，加入20ml完全培养基。

• 置于5% CO2、37℃培养箱中培养，显微镜下观察细胞形态。

注意事项

• 细胞处理过程需保持无菌操作。

• 培养条件需控制在37摄氏度、湿度70%-80%、5% CO2的环境中。

• 细胞传代时注意细胞密度，保持细胞生长状态良好。

• 细胞冻存前，添加DMSO并进行液氮冻存。