人脐静脉内皮细胞（HUVEC）是从新生儿脐带静脉血管的内皮组织中分离出的原代细胞。HUVEC细胞具有典型的“鹅卵石”状形态。

原代HUVEC细胞特性

• HUVEC细胞来源新生儿脐带静脉血管的内皮细胞，是脐静脉的重要组成细胞之一，取材容易，来源充足，常用于血管内皮研究。

• HUVEC细胞具有干细胞潜能，用于研究低氧、炎症、氧化应激、感染反应以及正常和肿瘤相关的血管生成等多个应用。

• 第二代中进行冷冻保存，以确保最高的生存能力和接种效率。

• 目HUVEC有原代人脐静脉内皮细胞和永生化人脐静脉内皮细胞两种主要类型,本货号为原代人脐静脉内皮细胞。

• 在特定的培养条件下，如添加人重组VEGF等生长因子，可以促进其增殖和特定功能研究。

• HUVEC细胞用于药物筛选、血管生成、小管形成、免疫反应、动脉硬化、高血压、血管伤口愈合、炎症、组织重塑、血管分化、氧化应激、细胞凋亡、支架开发等研究。

• HUVEC细胞可用于研究细胞因子诱导的激活和细胞黏附分子（如VCAM-1/CD106）的表达变化。

原代HUVEC细胞参数表

HUVEC原代细胞培养指南

细胞复苏

• 从液氮中取出HUVEC细胞冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻至管内残留一点冰屑。

• 用75% 酒精擦拭冻存管口，将内容物吸至一个15ml 无菌离心管中，逐滴加入预温至37℃的培养基（如RPMI-1640）10ml，混匀后室温1500rpm离心10分钟，弃上清。

• 用培养基4－5ml洗涤一次，离心后弃上清，加入适量的HUVEC完全培养液备用。每支HUVEC冻存管含细胞量为5×10^5个。

细胞接种培养

• 包被液：使用0.1% 明胶或多聚赖氨酸 PLL（0.1mg/ml）溶液包被培养瓶，置于37℃孵育箱中至少2小时或过夜。

• 接种前吸净包被液，按2500－5000个细胞/cm^2接种细胞。每瓶加培养基3-5ml，摇匀后置37℃孵育箱内培养24小时，直到细胞完全贴壁。

• 扩大培养：每周更换培养液2次，至细胞长至覆盖培养面的70-80%可进行传代或冻存。

细胞传代

• HUVEC细胞密度达80%-90%时，进行传代操作。

• 使用0.25% 胰酶-EDTA 消化细胞，注意消化时间控制在1-2分钟。

• 补充培养基后，离心4分钟，弃上清液，补加适量培养基吹匀后继续培养。

细胞冻存

• 调整HUVEC细胞数至2-5×10^6个/ml，配制冻存液或使用商品冻存液进行冻存。

• 将冻存管置于-80℃冰箱中24小时，转移到液氮保存。

注意事项

• 细胞有限传代：HUVEC原代细胞为原代有限传代细胞，到货后可传10代左右，3-5代内状态最佳，建议注意代次控制以避免细胞老化和失去特性。

• 培养难度和要求：HUVEC细胞培养具有一定的挑战性，使用专用培养基和高品质血清是保证细胞生长和研究准确性的关键。