CHO-K1细胞(Chinese Hamster Ovary K1),中国仓鼠卵巢细胞K1亚克隆,源自亲本CHO细胞系。CHO-K1细胞系于1957年由Theodore Puck在波士顿癌症研究基金会实验室首次分离,来源为成年雌性中国仓鼠的卵巢组织。CHO-K1细胞自1948年起在美国用于多种生物医学研究,随着亚克隆CHO-K1的分离,逐渐成为实验室研究和工业生产中的重要工具。
CHO-K1细胞广泛应用于生物技术和医药研究,尤其适合作为蛋白质药物生产和重组蛋白表达的宿主系统。1968年的研究还揭示了CHO-K1细胞缺乏合成甘氨酸的关键基因,因此需要在培养基中额外补充脯氨酸以维持其正常生长。
CHO-K1细胞特性特征
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倍体性:CHO-K1细胞的染色体组成为2n=22,属于亚二倍体(hypodiploid),表现出一定的遗传不稳定性。
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营养需求:CHO-K1细胞需要培养基中添加脯氨酸以支持其生长,因为它缺乏合成脯氨酸的能力。
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培养条件:适合在无血清或无动物成分的培养基中生长,能够在高密度下进行悬浮培养。
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病毒感染:CHO-K1细胞对水疱性口炎病毒(包括印第安纳州和格拉斯哥株)及盖塔病毒具有易感性。
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基因组稳定性:CHO-K1细胞的基因组可能经历了大规模的染色体重排,导致不同细胞系间染色体数目不一致。
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翻译后修饰能力:CHO-K1细胞能够进行复杂的翻译后修饰,生成与人类蛋白质相似的糖蛋白,是成为生产生物仿制药的理想宿主。
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组蛋白表达:CHO-K1细胞常用于重组蛋白的表达,能够有效地插入复杂的N-连接聚糖,有助于蛋白质折叠和运输。其糖基化模式接近人类细胞,这提高了蛋白质在体内的稳定性和活性。
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高产能力:CHO-K1细胞系在大规模培养中表现出高水平的蛋白质表达,适合用于工业化生产。
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遗传背景:CHO-K1细胞缺乏甘氨酸生物合成所需的基因,这一遗传缺陷使其依赖于外源性的脯氨酸。此外,CHO-K1细胞与大多数人类硫酸乙酰肝素葡糖胺O-磺基转移酶有同源基因,这表明其在某些代谢途径上与人类存在相似性
CHO-K1细胞参数表
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细胞名称
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CHO-K1细胞(仓鼠卵巢细胞亚株)
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细胞别称
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CHO K1; CHOK1; CHO cell clone K1; GM15452
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种属来源
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中国仓鼠(Cricetulus griseus)
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组织来源
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卵巢
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性别
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雌
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细胞形态
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上皮细胞样,贴壁生长
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倍增时间
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~24小时
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染色体组数
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2n=22(亚二倍体)
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生物安全等级
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1
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支原体检测
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无
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细胞规格
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1×10^6 cells/T25培养瓶或冻存管包装
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培养基
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F-12K + 10% 胎牛血清(FBS)
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培养条件
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气相:95%空气 + 5% CO₂;温度:37℃
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传代密度
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80%-90%
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传代比例
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1:2至1:5
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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病毒易感性
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水疱性口炎病毒、盖塔病毒
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主要应用领域
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工业生物技术、毒理学研究、重组蛋白表达
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生长培养基
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Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
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基因组稳定性
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存在遗传不稳定性,可能具有不同的染色体数目,已知有21条染色体。
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糖基化能力
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能够进行复杂的翻译后修饰,生成与人类蛋白质相似的糖蛋白。
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脯氨酸需求
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缺乏脯氨酸合成基因,需要在培养基中添加L-脯氨酸才能生长。
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冻存液配方
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无血清冻存液
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应用特性
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CHO-K1细胞是市场上超过70%的蛋白质药物的首选制造宿主。
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能够在无血清悬浮培养中以高密度生长,适合大规模生产。
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表达的重组蛋白在结构和功能上接近天然蛋白。
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