CV-1细胞（非洲绿猴肾细胞）

CV-1细胞系是从一只成年雄性非洲绿猴（学名：Chlorocebus aethiops）的肾组织中分离出的细胞系，由Jensen等人于1964年建立。CV-1细胞系广泛应用于病毒学和细胞生物学研究，用在Rous肉瘤病毒转化实验中。CV-1细胞系具备较强的适应性和增殖能力，也用于转染实验，是SV40载体的理想宿主。

CV-1细胞特性特征

染色体特征：CV-1细胞系为假二倍体，其模式染色体数目为60，48%的细胞中观察到该数目。多倍体率为4.4%。在细胞中发现了多个标记，包括可能缺失的N11和未知来源的M3等。
基因组特征：N11和N16在大多数细胞中均为单拷贝，同时检测到X和Y染色体。
CV-1细胞对多种病毒表现出易感性，包括：人类脊髓灰质炎病毒1型、单纯疱疹病毒、东部马脑炎病毒、西马脑炎病毒、加利福尼亚脑炎病毒、SV40病毒、SARS冠状病毒（SARS-CoV）
转染宿主：CV-1细胞适合通过SV40载体进行转染，被广泛应用于基因转染实验。
病毒研究：CV-1细胞常用于病毒的生产和效能测试，以及其他病毒学实验

CV-1细胞参数表

细胞名称	CV-1细胞（非洲绿猴肾细胞）
细胞别称	Cv-1; CV 1; CV-1.K; CV1
细胞来源	Chlorocebus aethiops成年雄性非洲绿猴的肾脏组织
建立时间	1964年,由Jensen等人建立
供体信息	141天雄性非洲绿猴
细胞形态	成纤维细胞样,贴壁生长
培养基	MEM（ATCC 改良）＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	温度：37°C，CO₂浓度：5%
传代方式	胰酶消化
传代比例	1:2至1:4
换液频率	每周2-3次
冻存条件	90%胎牛血清 + 10% DMSO
生物安全等级	1,操作需在二级生物安全台内进行
质量检测	无细菌、真菌、支原体污染,所有检测均为阴性
染色体特征	假二倍体,模式染色体数目为60，48%的细胞中观察到
多倍体率	4.4%,在细胞中发现多个标记
X/Y染色体检测	X和Y染色体均被检测到,所有细胞中均存在
病毒易感性	人类脊髓灰质炎病毒1型、单纯疱疹病毒、东部马脑炎病毒、西马脑炎病毒、加利福尼亚脑炎病毒、SV40病毒、SARS冠状病毒（SARS-CoV）
生长特性	贴壁生长，适合在标准培养条件下繁殖。
基因特征	N11和N16在大多数细胞中均为单拷贝。
标记特征	发现了几个标记，包括可能缺失的N11和未知来源的M3等。

培养教程

CV-1非洲绿猴肾细胞培养教程

CV-1细胞复苏步骤

解冻：将冻存的CV-1细胞从液氮中取出，迅速置于37°C水浴中，轻轻摇动，约1-2分钟完全解冻。
初步培养：将解冻后的CV-1细胞悬液转移至含10% FBS的培养基中，并轻轻混匀，以减少渗透压的变化对细胞的影响。
离心去除冷冻保护剂：以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
重新悬浮和接种：用新鲜培养基重悬CV-1细胞，并接种至适当的培养瓶中（如T25或T75瓶），置于培养箱中恢复生长。

CV-1细胞的传代方法

观察细胞状态：在显微镜下检查CV-1细胞的形态，确保其健康、无污染。
更换培养基：通常每3天更换一次培养基，以确保CV-1细胞所需的营养充足。
使用0.25%的胰酶溶液，处理CV-1细胞3-5分钟，观察细胞是否开始脱落。
轻轻吹打培养瓶，以促进CV-1细胞的完全分离。
传代比例：根据细胞密度，可选择1:2至1:4的比例进行传代，确保CV-1细胞在新的培养瓶中充分生长。
重新接种：将消化后的CV-1细胞重悬于新鲜培养基中，移至新的培养瓶中。

CV-1细胞的冷冻保存

选择对数生长期的CV-1细胞：在细胞生长的对数期进行冷冻保存，以确保较高的活性。
冷冻液：使用90% FBS和10% DMSO的冷冻保护液。
分装：将CV-1细胞悬液分装到冻存管中，标记清楚。
逐步降温：先将冻存管置于-80°C冰箱中，24小时后转移至液氮中长期保存。