VERO C1008（也称为Vero E6）是一株从非洲绿猴（Chlorocebus aethiops）肾脏上皮细胞中分离并衍生出的细胞系，是Vero 76细胞的克隆衍生株，而Vero 76细胞则是最早建立的VERO细胞株之一。Vero细胞系最早由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita于1962年分离和扩增，得名“VERO”来自世界语“Verda Reno”，意指“绿色的肾脏”，也象征着“真相”。

Vero E6细胞因低传代特性及高活力，在生物医学领域，特别是病毒学研究、疫苗生产和药物筛选中应用广泛，常用于病原体分离与增殖研究。

Vero E6细胞特性特征

• 生长特性：Vero E6细胞系在培养时形成单层膜，并表现出一定程度的接触抑制，适合用于慢速复制病毒的培养。

• 非整倍体：Vero E6细胞是连续的非整倍体细胞，这意味着其染色体数目与正常细胞不同，能够在多次分裂后保持活性。

• 干扰素反应：Vero E6细胞系具有干扰素分泌缺陷，无法自主分泌干扰素，但仍然对外源性α/β-干扰素有正常反应，这使其在研究病毒感染机制时具有一定的优势。

• 基因组稳定性：Vero E6细胞系在多次传代后保持较高的基因组稳定性，这对于长期实验和药物筛选至关重要

Vero E6细胞参数表

Vero E6细胞（非洲绿猴肾细胞VERO C1008）培养教程

细胞复苏

• 检查收到的Vero E6细胞冻存管，确保其完好无损且无泄漏。

• 准备适宜的Vero E6细胞培养基：89%高糖DMEM培养基，加入10%胎牛血清及1%抗生素以防污染。

• 将含1 mL Vero E6细胞悬液的冻存管放入37℃水浴中迅速解冻，解冻时间约1至2分钟。

• 解冻后，将细胞悬液转入装有4 mL预温培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。

• 将Vero E6细胞沉淀重新悬浮于1-2 mL新鲜培养基中，轻轻吹打以均匀分布。

• 将细胞悬液转移至培养瓶中，加入约8 mL培养基后置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜培养，以便Vero E6细胞复苏并适应新的培养环境。

细胞传代

• 当Vero E6细胞生长达到80%-90%汇合时即可传代，避免过度拥挤导致的生长受限。

• 弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的PBS缓冲液洗涤Vero E6细胞1至2次，以去除残留物质。

• 加入1 mL含0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 观察Vero E6细胞状态，待大部分细胞变圆松散时，即可终止消化。

• 轻轻敲打培养瓶壁停止消化，并加入少量新鲜培养基稀释消化液。

• 将消化后的Vero E6细胞悬液转移至离心管中，加入6-8 mL新鲜培养基后，离心（1000 RPM, 4分钟）去除上清。

• 将Vero E6细胞沉淀重新悬浮于适量新鲜培养基中，根据需求将细胞按1:2至1:4的比例分装至新的培养瓶中，每瓶加入约8 mL培养基。

细胞冻存

• Vero E6细胞冻存液配方为55%基础培养基、40%胎牛血清及5%DMSO。

• 当Vero E6细胞生长良好并达到80%-90%汇合度时，收集细胞以进行冻存。

• 按照传代步骤消化和收集Vero E6细胞，并将其重新悬浮在适量的冻存液中。

• 将Vero E6细胞悬液分装至冻存管中，每管约含1 mL细胞。

• 将冻存管置于-80℃冰箱中预冷24小时，然后转移至液氮罐中长期保存，以确保Vero E6细胞的活力。

注意事项

• 污染监测：每次操作前后应仔细检查Vero E6细胞的污染情况。如有污染，应及时处理并报告。

• 换液频率：建议每周换液2至3次，以维持Vero E6细胞的最佳生长环境并清除代谢废物。