BS-C-1细胞（非洲绿猴肾细胞）

BS-C-1细胞系是一种具有上皮形态的细胞，来源于非洲绿猴（学名：Cercopithecus aethiops）的肾脏组织。BS-C-1细胞系于1961年由Hopps等人通过原代培养并筛选而建立，表现出自发永生化的特性，适用于长期培养。在病毒学和药物筛选方面广泛应用，特别在病毒敏感性方面表现突出。BS-C-1细胞系是合适的转染宿主，可用于检测病毒，适合SV40载体转染的非洲绿猴肾细胞系。

BS-C-1细胞特性特征

染色体频率：2n=60，具有一条大型亚中部中心标记染色体。
染色体特征：具备一条大型亚中部标记染色体，部分细胞含有次级收缩染色体和双着丝粒染色体。
基因表达：主要表达角蛋白，表明其上皮细胞的特性。
免疫组化结果：通过免疫过氧化物酶染色，角蛋白呈阳性。
病毒易感性：对1型脊髓灰质炎病毒（Poliovirus type 1）敏感、对SV40病毒（SV40 virus）敏感、对水泡性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus）敏感，包括奥赛（印第安纳州）和格拉斯哥（印第安纳州）的株系

BS-C-1细胞参数表

细胞名称	BS-C-1细胞（非洲绿猴肾细胞）
细胞别称	BSC-1; BSC1; GMK, BSC-1; Biologics Standards-Cercopithecus-1
来源	非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）肾脏组织
建立时间	1961年
细胞形态	上皮细胞样
细胞类型	自发永生化细胞
生长特性	贴壁生长
生物安全等级	BSL-1
培养基	MEM（含 NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
培养环境	空气95%；CO₂ 5%；37℃
倍增时间	~72小时
传代比例	1:3 - 1:4
换液频率	每周2-3次
冻存条件	55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO
冻存方式	液氮
病毒易感性	对SV40病毒、脊髓灰质炎病毒（Poliovirus type 1）、水泡性口炎病毒敏感
基因表达特征	表达角蛋白
染色体特征	2n=60，含一条大型亚中部中心标记染色体，部分细胞含双着丝粒染色体。
培养代数	可培养至40-50代
保藏机构	ATCC; CCL-26; BCRC; GDC0033; CLS; ECACC等
供应限制	仅供科研使用
应用领域	病毒学研究：用于病毒的传播和分离研究。
	药物筛选和转染实验：特别适合SV40载体的转染。
	基础生物学研究：用于细胞增殖、分化等方面的实验。

培养教程

BS-C-1非洲绿猴肾细胞培养教程

BS-C-1细胞复苏

将BS-C-1细胞冻存管从液氮中取出后，迅速置于37℃水浴中解冻，轻轻摇动，直至BS-C-1细胞悬液完全融化。
将解冻后的BS-C-1细胞悬液缓慢加入4 mL完全培养基中，轻轻混匀。
在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清。
用1-2 mL新鲜培养基重悬BS-C-1细胞，轻轻吹打均匀。
将重悬的BS-C-1细胞转移至培养瓶或10 cm培养皿，加入8 mL培养基。
放置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜，次日更换培养基并观察BS-C-1细胞的状态。

BS-C-1细胞传代

传代条件：当BS-C-1细胞生长密度达到80%-90%时应进行传代。
注意：观察BS-C-1细胞是否开始变圆并脱落。
观察BS-C-1细胞生长状态，移去培养瓶封口膜，将其置于37℃下孵育2-3小时，使BS-C-1细胞恢复状态。
弃去培养基，用预温的无钙镁PBS缓冲液清洗BS-C-1细胞1-2次。
加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA），置于37℃培养箱消化1-2分钟。
添加少量培养基以终止消化，轻轻吹打使BS-C-1细胞完全脱壁。
将BS-C-1细胞悬液加入6-8 mL新鲜培养基中混匀，再次在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清。
将BS-C-1细胞按比例（1:3或1:4）分装到新的培养瓶中，加入8 mL培养基，并置于培养箱中继续培养。

BS-C-1细胞冻存

冻存条件：在BS-C-1细胞状态良好且处于对数生长期时进行冻存。
配制BS-C-1细胞冻存液：55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。
收集BS-C-1细胞并离心，弃去上清后，用冻存液重悬BS-C-1细胞。
将BS-C-1细胞悬液分装入冻存管，标记清晰。
将BS-C-1细胞冻存管放入-80℃冰箱中过夜，随后转移至液氮罐中保存。