B95-8细胞（绒猴EB病毒转化的白细胞）

B95-8细胞株是一种由绒猴（Macaca mulatta）的外周血淋巴细胞通过Epstein-Barr病毒（EB病毒）转化形成的细胞系，将绒猴的EB病毒转化的白细胞暴露于从人类白细胞中提取的EB病毒，进而通过病毒感染实现细胞的持续增殖。B95-8细胞系具备显著的连续传代能力，倍增时间约为40小时，同时能够释放高滴度的EB病毒，被广泛应用于病毒学和免疫学研究中，尤其适合用于EB病毒的转染研究和人类淋巴细胞系的建立。

B95-8细胞特性特征

高滴度EB病毒释放：B95-8细胞是一个连续株，能够释放高滴度的EB病毒，成为研究EB病毒及其相关疾病的重要工具。
EB病毒基因组：B95-8细胞中携带有EB病毒的基因组，能够在感染后持续表达EB病毒的相关蛋白。
表面标志物：B95-8细胞通常表达B细胞特异性标志物，如CD19、CD20等，这些标志物在免疫学研究中具有重要意义。
蛋白质表达：B95-8细胞能够表达多种与EB病毒相关的蛋白质，包括潜伏膜蛋白（LMP）和早期抗原（EA），这些蛋白在研究EB病毒的潜伏感染及其致病机制中至关重要。
基因表达谱：研究表明，B95-8细胞的基因表达谱与正常B细胞有所不同，这为理解EB病毒如何影响宿主细胞提供了线索

B95-8细胞参数表

细胞名称	B95-8细胞（绒猴EB病毒转化的白细胞）
细胞别称	B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D
来源	绒猴外周血淋巴细胞通过EB病毒转化
细胞类型	悬浮细胞
形态特征	外周血淋巴细胞样
原始来源	Cotton-top Tamarin Monkey
细胞特性	Lymphoblasts（淋巴母细胞）
培养基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
胰蛋白酶消化浓度	0.25%
倍增时间	约40小时
接种密度	1:2至1:4
培养密度	3-9 x 10^5 cells/ml
换液周期	每2-3天更换一次培养基
培养环境	温度：37℃，CO₂浓度：5%
EB病毒基因组	存在EB病毒相关基因
表面标志物	CD19、CD20等B细胞特异性标志物
蛋白质表达	表达潜伏膜蛋白（LMP）和早期抗原（EA）
遗传稳定性	良好的遗传稳定性，适合长期实验
基因表达谱	与正常B细胞有所不同
其它特性	高滴度EB病毒释放；连续传代能力
应用领域	病毒学、免疫学、疫苗开发
冻存条件	-80℃或液氮中保存

培养教程

B95-8绒猴EB病毒转化的白细胞培养教程

细胞复苏

将培养B95-8细胞的培养基预热至37℃。
在生物安全柜内进行操作，确保无菌环境，以避免B95-8细胞受到污染。
从液氮中取出B95-8细胞冻存管，立即置于37℃水浴中，轻轻摇晃，约1-2分钟后完全解冻。
将解冻的B95-8细胞转移至无菌离心管中，加入5-10毫升预热培养基，混匀。
200-300g条件下离心5分钟，弃去上清液以去除冷冻保护剂，确保B95-8细胞复苏的完整性。
用新鲜培养基将B95-8细胞重悬，并根据培养需求选择合适的培养容器，例如在6cm培养皿中加入10ml培养基。
将B95-8细胞培养皿置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养，以确保细胞正常生长。

细胞传代

每2-3天观察B95-8细胞的形态和密度，注意是否有污染迹象，保持B95-8细胞的健康状态。
当B95-8细胞密度达到70%-80%时进行传代。
弃去旧培养基，用无钙镁的PBS（磷酸盐缓冲液）洗涤B95-8细胞。
加入0.25%胰蛋白酶溶液，在37℃下消化2-5分钟，观察B95-8细胞是否开始脱落。
加入等体积的培养基终止胰酶消化，轻轻吹打使B95-8细胞重悬。
按适当比例（如1:2或1:4）将B95-8细胞重悬液接种至新的培养皿中，加入新鲜培养基。
将B95-8细胞继续在37℃、5% CO₂的培养箱中培养，确保细胞增殖的稳定性。

注意事项

培养B95-8细胞时，应严格无菌操作，避免细菌和真菌污染。
通过显微镜观察B95-8细胞的生长状态，定期检查以确认细胞健康，如发现培养基颜色异常或沉淀等污染迹象，应立即处理。
控制B95-8细胞的传代频率，确保每次传代的细胞密度适中，避免过度或不足的传代。