NCI-H2009细胞系是一种人肺腺癌细胞系，于1983年建立，分离自一名68岁白人女性4期腺癌患者的转移淋巴结。该患者有长期吸烟史（约三十包年），并在手术前接受了放化疗。NCI-H2009细胞系表现出上皮细胞样的形态，广泛应用于肺癌研究，特别是在新疗法和药物效果的评估方面，帮助研究人员深入了解肺腺癌的生物学特性，并为药物筛选和治疗方法的开发提供了重要的实验模型。此外，NCI-H2009细胞系与NCI-BL2009细胞系均来源于同一名患者。

NCI-H2009细胞参数表

细胞名称	NCI-H2009细胞（人肺腺癌细胞）
细胞别称	NCIH2009; H2009; H-2009
种属来源	人
年龄/性别	68岁女性
组织来源	肺，来源于转移淋巴结
疾病	肺腺癌
建立时间	1983年
生物安全等级	1
细胞规格	1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管
支原体检测	无
细胞代数	10代以内
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
培养基	DMEM/F12 + 5% FBS + 5μg/ml胰岛素 + 0.01 mg/ml转铁蛋白 + 30 nM亚硒酸钠 + 3.625 ng/ml氢化可的松 + 4.5 mM L-谷氨酰胺 + 1%双抗
培养条件	95%空气 + 5% CO2; 温度：37°C
传代比例	1:2至1:6
传代频率	每周2至3次
倍增时间	约24-48小时
保存条件	无血清冻存液，液氮储存
冻存条件	液氮气相储存
使用限制	仅限于科学研究，不可用于动物或人类疾病的治疗
微生物检测	阴性
pH值	7.2-7.4

NCI-H2009人肺腺癌细胞培养教程

细胞接收与处理

• 收到H2009细胞时，首先用75%酒精对培养瓶进行消毒。

• 在超净台内打开培养瓶，确保操作的无菌性。

• 如果H2009细胞在运输过程中未达到80%汇合度，将培养瓶中的培养液转移至离心管中。

• 加入6 mL完整培养基，放入37°C培养箱中孵育2-4小时以恢复细胞。

细胞生长与观察

• 生长特性：H2009细胞为贴壁生长，细胞形态呈上皮样。

• 定期检查H2009细胞的生长状态，确保细胞无污染（如支原体污染）。

• 当H2009细胞密度达到80%-90%时，进行传代。

传代操作

• 传代频率：每周进行2-3次传代，以保持H2009细胞的健康状态。

• 用PBS缓冲液洗涤H2009细胞，去除旧培养基。

• 使用0.25%胰蛋白酶消化H2009细胞，待细胞脱落后加入完整培养基终止消化。

• 混匀后，根据需要将细胞按照1:2至1:6的比例分装至新的培养瓶中。

冻存与复苏

• 使用无血清冻存液，将H2009细胞悬浮于冻存液中，分装至冻存管中。

• 将冻存管置于-80°C冰箱中冷冻24小时后转移至液氮储存。

• 从液氮中取出冻存管，迅速在37°C水浴中解冻。

• 解冻后，立即加入完整培养基，轻轻混匀并转移至培养瓶中，置于37°C培养箱中恢复H2009细胞。

注意事项

• 定期检测H2009细胞是否有支原体污染，必要时使用支原体检测试剂盒。

• 传代操作时保持无菌环境，定期清洁和消毒实验室。

• 在H2009细胞培养过程中，注意个人卫生，以防交叉污染。