MARC145细胞（非洲绿猴胚胎肾细胞）

MARC145细胞系是从非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）的胚胎肾上皮细胞中衍生出来的，为母细胞系MA-104的克隆细胞，MA-104细胞系同样来源于非洲绿猴的肾组织，而非恒河猴。MARC145细胞具备稳定的上皮样形态，能够在体外连续培养并具有快速增殖的特性。MARC145细胞系因对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）高度敏感而受到广泛应用，尤其适合用于PRRSV的感染机制研究和疫苗生产。

MARC145细胞特性特征

MARC145细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）具有高度敏感性，是该病毒研究的重要模型。
MARC145细胞在接种PRRSV后，通常在24至48小时内开始出现病变，72至96小时达到80%的病变率。
MARC145细胞系表达多种与病毒感染相关的受体和辅助因子，这使其成为研究病毒感染机制的理想模型。
在无血清培养条件下，MARC-145细胞可以使用含有胰岛素样生长因子、表皮生长因子和成纤维生长因子的培养基，以促进其快速增殖并降低动物源成分的含量，从而提高疫苗的安全性。
MARC-145细胞广泛应用于病毒学研究、疫苗开发以及药物筛选等领域

MARC145细胞参数表

细胞名称	MARC145细胞（非洲绿猴胚胎肾细胞）
细胞别称	Marc-145; MARC 145; Marc 145; MARC145; Marc145; Meat Animal Research Center-145
细胞来源	非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）胚胎肾细胞
母细胞系	MA-104
细胞类型	上皮样细胞
传代特性	可连续传代
细胞形态	扁平或多边形，贴壁生长
感染敏感性	对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）高度敏感
适用病毒	PRRSV、鸡传染性支气管炎病毒（IBV）、猪小病毒（PPV）
培养基	DMEM＋10% FBS＋1% P/S
培养环境	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
pH值	7.0 - 7.3（最佳7.2）
传代比例	通常为1:2或1:3
培养时间	通常48小时后可观察到细胞单层形成
冻存液	生长培养基 + 10% DMSO
冻存温度	-80℃（短期），液氮（长期）
生长模式	贴壁生长
最大细胞密度	在生物反应器中可达8×10^6 cells/mL
无血清培养基成分	胰岛素样生长因子 5μg/mL 表皮生长因子 10μg/mL 成纤维生长因子 8μg/mL 转铁蛋白 15μg/mL 亚硒酸钠 25μg/mL 小麦蛋白酶解物 4mg/mL 酶解明胶溶液 2%体积百分比乙醇胺 15μg/mL
检测污染	定期检查支原体等污染
培养注意事项	确保无支原体感染，及时传代，避免细胞老化

培养教程

MARC145非洲绿猴胚胎肾细胞培养教程

MARC145细胞复苏

将含MARC145细胞的冻存管在37℃水浴中迅速解冻，并轻轻摇晃至完全融化。
向解冻的MARC145细胞悬液中缓慢加入4mL DMEM培养基，混匀。
以1000 RPM离心4分钟，去除上清液。
补加1-2mL新鲜培养基并轻轻吹打，均匀悬浮MARC145细胞。
将细胞悬液转移至培养瓶，并置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜培养，确保MARC145细胞附着和恢复。

MARC145细胞传代

当MARC145细胞生长至80%-90%汇合度时，弃去旧培养基，用PBS清洗细胞1-2次。
加入1mL胰蛋白酶消化液于培养瓶中，放置于37℃培养箱消化1-2分钟，密切观察MARC145细胞是否变圆、脱落。
加入适量新鲜培养基终止消化，并轻轻吹打，确保MARC145细胞完全分散。
以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
重悬MARC145细胞于新鲜培养基中，按1:2的比例分瓶，并加入适量DMEM培养基，放入培养箱继续培养。

MARC145细胞冻存

在MARC145细胞状态良好时，将培养基弃去，用PBS清洗一次。
加入胰蛋白酶消化MARC145细胞，待细胞变圆时加入1mL含血清的培养基中止消化。
离心后去除上清液，重悬于适量的血清中，同时加入DMSO使终浓度为10%。
将MARC145细胞悬液分装于冻存管中，放入程序降温盒，置于-80℃冷冻2小时后转入液氮保存。

MARC145细胞培养注意事项

污染防控：应确保培养过程无支原体等污染，定期检查MARC145细胞的状态。
pH控制：MARC145细胞培养液pH值保持在7.0-7.3之间，最佳为7.2。
传代频率：当MARC145细胞达到适当密度（80%-90%汇合）时传代，避免长时间培养导致细胞状态老化。
异常情况：若MARC145细胞出现污染或状态异常，需及时处理并联系细胞供应商。