MPC5细胞（小鼠肾足细胞）

MPC-5小鼠肾足细胞是一种通过温度敏感的SV40大T抗原（SV40LT）转基因永生化的细胞系，广泛用于研究足细胞的分化与形态形成过程。MPC5细胞在体外能够模拟体内足细胞的发育与成熟，增殖和分化阶段均表达WT-1蛋白。在分化过程中，肌动蛋白纤维和微管的有序排列展现了足细胞在体内的发育机制，有助于深入理解其成熟过程。MPC-5细胞系来自小鼠（Mus musculus）的肾小球足细胞，作为贴壁生长的上皮样细胞，通过SV40LT的转基因实现永生化，使其在体外具备长期增殖能力，适用于肾小球功能及相关疾病的深入研究。

MPC5细胞特性特征

永生化机制：MPC5细胞通过转染编码SV40大型T抗原（SV40LT）的温度敏感转基因实现永生化，使得细胞能够在体外长期增殖。
WT-1蛋白：在MPC5细胞增殖和分化过程中均有表达，参与调控足细胞的发育。
MPC5细胞表现出分化足细胞的特征性抗原标记物，包括nephrin、podocin、CD2AP和突触足蛋白（synaptopodin）。
在分化过程中，MPC-5细胞表现出肌动蛋白纤维和微管的有序排列，这对于理解祖细胞在体内的发育和成熟过程至关重要。
生理相关表型：MPC-5细胞能够提供类似于体内分化肾细胞的生理相关表型，便于相关研究。
稳定性与同质性：作为一种同质、稳定的细胞源，MPC-5细胞在实验中表现出一致性，有助于提高实验结果的可靠性

MPC5小鼠肾足细胞参数表

细胞名称	MPC5细胞（小鼠肾足细胞）
别称	MPC5; Mouse Podocyte Clone-5
来源	肾足细胞；SV40转化；(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58)永生鼠
种属来源	小鼠（Mus musculus）
组织来源	肾脏，特别是肾小球中的足细胞（podocytes）
细胞形态	上皮细胞样
细胞类型	贴壁生长
细胞代数	10代以内
支原体检测	阴性
培养基	89% DMEM + 10% FBS + 1% PS
培养条件	温度：37℃，气相：95%空气 + 5% CO₂
换液周期	每2-3天一次
培养基体积	T25瓶：10-12 mL；10 cm皿：12-15 mL
传代比例	1:2至1:4
传代频率	每周2-3次
冻存液配方	90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存条件	液氮储存
冻存规格	200-300万/ml，1ml每管
生物安全等级	2
致瘤性	无
注意事项	消化时间需严格控制，避免过度消化；冻存后及时复苏以检查活性。
关键蛋白表达特征	WT-1蛋白、Nephrin、足细胞素、CD2AP、突触足蛋白

培养教程

MPC5小鼠肾足细胞培养教程

MPC5细胞复苏

将冻存的MPC5细胞管在37℃水浴中迅速解冻，轻轻摇晃确保细胞完全解冻。
加入4 mL预先准备好的培养基，混合均匀。
在1000 RPM条件下离心4分钟，去除上清液。
补加1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打悬浮细胞。
将复苏的MPC5细胞加入培养瓶或10 cm培养皿中，加入约8 mL培养基。
培养过夜，第二天更换培养基，并检查细胞的生长状态。

MPC5细胞传代

当MPC5细胞密度达到80%-90%时，进行传代操作。
弃去培养上清液，使用无钙镁离子的PBS缓冲液洗涤细胞1-2次。
加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察MPC5细胞是否大部分变圆并开始脱落。
轻敲培养瓶，加入适量培养基终止消化过程。
补加6-8 mL新鲜培养基，轻轻吹打悬浮细胞，在1000 RPM条件下离心4分钟，去除上清液。
按1:2比例将MPC5细胞分到新的含有8 mL培养基的培养皿中。

MPC5细胞冻存

当MPC5细胞生长状态良好时，可进行冻存操作。
冻存液为90%完全培养基和10% DMSO。
弃去培养基后，加入少量胰蛋白酶消化细胞，使MPC5细胞变圆脱落。
加入1 mL含血清的培养基后，将细胞悬液转移至冻存管。
加入10% DMSO，确保MPC5细胞在冻存时免受损伤。随后，放入-80℃冻存，再转移至液氮中长期保存。