C127细胞（小鼠乳腺肿瘤细胞）源自RⅢ小鼠的乳腺恶性肿瘤，是一种未经转化的细胞克隆株。与许多其他肿瘤细胞系不同，C127细胞在体外培养时未经历转化，因此其上清液中不含逆转录酶活性。C127细胞系广泛应用于肉瘤病毒诱导的细胞聚集实验以及牛刺瘤病毒的体外定量检测。

C127细胞特性特征

• 增殖速率：C127细胞增殖速度快，适合在不同实验条件下仔细检查细胞过程、生长和分化。

• 逆转录酶活性：C127细胞的上清液不含逆转录酶活性。

• 肿瘤研究：C127细胞常用于研究乳腺癌的发生与发展机制，尤其是在药物作用和细胞信号通路的研究中。

• 病毒研究：广泛应用于肉瘤病毒诱导的聚集实验及牛刺瘤病毒的体外定量测试。最近，C127细胞也被用作牛刺瘤病毒DNA质粒转化的受体。

• 基因特征：C127细胞在基因表达上具有特定的特征，适合用于转基因研究和基因功能分析

C127细胞参数表

C127小鼠乳腺肿瘤细胞培养教程

C127细胞复苏步骤

• 从液氮罐中取出C127细胞冻存管，并立即将其置于37℃的水浴中，轻轻摇动，直至C127细胞完全融化（通常不超过1分钟）。

• 将融化后的C127细胞悬液迅速转移至含有9 mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀以稀释DMSO。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，保留C127细胞沉淀。

• 用1-2 mL完全培养基重悬C127细胞沉淀，将悬液转移到新的T25或T75培养瓶中，并加入足量的完全培养基。

• 将培养瓶放入培养箱中，培养至C127细胞贴壁并开始增殖。

C127细胞传代操作

• 当C127细胞的汇合度达到70-80%时，准备进行传代操作。

• 吸除培养基后，用无钙镁的PBS缓冲液洗涤C127细胞层两次，去除残留的血清。

• 加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，温和消化C127细胞，通常需要1-2分钟，避免过度消化。

• 观察C127细胞边缘变圆并开始脱落时，立即加入6-8 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打培养瓶底部，确保C127细胞完全分散。

• 将C127细胞悬液按1:3至1:5的比例分装至新的培养瓶中，加入适量的完全培养基。

• 将新培养瓶放回培养箱中，按需定期更换培养基，通常每2-3天更换一次。

C127细胞冻存方法

• 当C127细胞汇合度达到70-80%时，可以进行细胞冻存操作。

• 按上述传代步骤消化C127细胞后，用含55%基础培养基、40%胎牛血清（FBS）和5%DMSO的冻存液重悬C127细胞，确保细胞浓度达到1×10⁶ cells/mL。

• 将C127细胞悬液分装至冻存管中，密封并标记。

• 将C127细胞冻存管缓慢降温，首先在-80℃冷冻24小时，然后转移至液氮中长期保存，以保持C127细胞的活力。

注意事项

• 在所有操作中务必保持无菌，以避免C127细胞污染，定期检查培养环境。

• 定期观察C127细胞的形态，确保C127细胞健康生长，若发现C127细胞形态异常，需及时采取措施。

• 定期监测C127细胞的培养基pH值，确保其在7.2-7.4之间，维持适宜的生长环境。