Hepa 1-6小鼠肝癌细胞系源自C57L/J小鼠自发产生的BW7756肝癌，属于C57/L小鼠肝癌细胞系Hepa-1的衍生系。与通过化学转化或诱导产生的肝癌模型（如BNL、MH-129、MH134和MH-22A）不同，Hepa 1-6细胞代表了一种更接近人类肝癌发病机制的自发性模型。

Hepa 16细胞特性特征

• hepa16细胞是一种自发性肝癌模型,更接近人类肝癌的发病机制

• hepa16细胞表达多种肝脏相关蛋白质,如甲胎蛋白（AFP）、α1抗胰蛋白酶和淀粉酶

• 经检测,hepa16细胞鼠痘病毒（ectromelia virus）呈阴性

• hepa16细胞可以在无血清的培养基中繁殖

• hepa16细胞可用于构建小鼠肝癌模型,研究肝癌发病机制和治疗方法；可用于3D细胞培养和癌症研究；是一种合适的转染宿主

Hepa 16细胞参数表

Hepa 16小鼠肝癌细胞培养教程

细胞消化步骤

• 将培养瓶中的培养基完全抽走，用5mL PBS润洗培养瓶1-2次，以去除Hepa16细胞残留的培养基成分。

• 吸尽PBS后，加入1mL预热的0.25%胰酶-EDTA溶液，轻轻摇晃培养瓶使胰酶均匀覆盖瓶底，确保Hepa16细胞能够被均匀消化。

• 将培养瓶置于37°C培养箱中，进行消化处理，并每隔1分钟观察Hepa16细胞形态变化。

• 当Hepa16细胞明显回缩并有部分开始脱落时，迅速加入3-4mL含有血清的培养基以终止胰酶的消化作用。

• 轻柔地吹打培养瓶以使贴壁的Hepa16细胞脱落，操作时应注意避免对Hepa16细胞造成机械损伤。

细胞收集与洗涤

• 将消化后的Hepa16细胞悬液转移至离心管中，以1000rpm离心3分钟以收集Hepa16细胞沉淀。

• 小心吸去上清，加入适量预温的培养基后，轻轻重悬Hepa16细胞沉淀，确保Hepa16细胞均匀分布。

细胞接种

• 在新的培养瓶中加入适量新鲜预温的培养基（T25培养瓶推荐10mL，T75培养瓶推荐15mL），为Hepa16细胞提供良好的生长环境。

• 将重悬后的Hepa16细胞悬液均匀地接种到培养瓶中，可以使用十字法或“8”字法混匀，以确保Hepa16细胞在培养瓶中的均匀分布。

• 轻轻摇晃培养瓶使Hepa16细胞均匀分布，然后将其置于37°C、5% CO2培养箱中进行培养。

细胞观察与换液

• 在接种Hepa16细胞后24-48小时内，观察细胞的贴壁生长情况，确保Hepa16细胞正常贴壁。

• 每2-3天更换一次新鲜培养基，吸去旧培养基时应注意避免吸到Hepa16细胞层。

• 当Hepa16细胞密度达到80%左右时，开始下一轮传代培养。

注意事项

• Hepa16细胞贴壁较弱，因此消化时间应控制在较短的范围内，以避免过度消化影响Hepa16细胞的活力。

• 如果培养瓶中出现较多Hepa16细胞碎片，可以通过PBS润洗和换液的方式清除。

• 低密度培养时，Hepa16细胞形态可能较为多样；而高密度培养时，Hepa16细胞形态则相对均一。

• 一些贴壁的Hepa16细胞可能呈现发亮的球形，这属于正常现象，不影响Hepa16细胞的整体状态。