Neuro-2a（N2a）小鼠神经母细胞瘤细胞系是由R.J. Klebe和F.H. Ruddle于1969年通过A株小鼠的自发肿瘤建立。N2a细胞来源于小鼠脑神经母细胞，具有神经元和变形虫干细胞的形态特征，常用于研究神经生物学过程及相关疾病机制，如缺血性脑卒中和焦虑障碍。
Neuro-2a细胞以其大量产生微管蛋白而著称，这些蛋白在神经细胞内起着重要作用，参与了轴浆流动的收缩系统的调控。N2a细胞系为研究长春新碱引发的微管蛋白沉淀机制、GTP与分离蛋白的结合动力学、微管蛋白在细胞内的周转与合成、以及微管的组装等提供了宝贵的研究模型。

Neuro-2a细胞的核型不稳定，染色体数目介于59到193之间，模态数为95。染色体通常表现出中位或亚中位着丝粒的大染色体6至10条，以及2至4条微小染色体。这种染色体的不稳定性在文献中也有报道，且通常与ATCC的初始种子库信息一致。

N2a小鼠脑神经瘤细胞特性特征

• 抗原表达: N2a细胞表达H-2单倍型抗原，属于小肌肉（Mus musculus）类型。

• 病毒易感性: N2a细胞对单纯疱疹病毒、水疱性口炎病毒和人脊髓灰质炎病毒1型敏感。

• 基因表达:乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase），参与神经递质的代谢；微管蛋白（tubulin），在神经细胞中起到轴浆流动的收缩系统作用。

• Neuro-2a细胞还被世界动物卫生组织（OIE）用于狂犬病的常规诊断，并广泛应用于神经科学和毒理学研究。

• N2a细胞系经检测鼠痘病毒阴性。

Neuro-2a细胞参数表

Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冷冻保存的N2a细胞管，迅速放入37℃水浴中，轻轻摇动，直至N2a细胞完全融化（约1-2分钟）。

• 将融化的N2a细胞悬液转移至一个装有10 ml完全培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 以900 rpm的速度离心5分钟，弃去上清液，保留沉淀的N2a细胞。

• 加入1-2 ml新鲜的培养基，轻轻重悬N2a细胞。

• 将N2a细胞转移至一个T25培养瓶中，补充培养基至10-12 ml。

• 将培养瓶置于37℃培养箱中培养N2a细胞，使其恢复生长。

细胞传代

• 当N2a细胞密度达到80%-90%时，可进行传代操作。

• 吸去培养瓶中的旧培养基，尽量清除干净，以避免残留物影响N2a细胞的传代。

• 用3-4 ml常温PBS轻轻洗涤N2a细胞10-20秒，然后吸去PBS。

• 加入1 ml胰酶溶液，轻轻摇动培养瓶，使胰酶均匀覆盖N2a细胞层。

• 将培养瓶置于37℃培养箱中消化，观察N2a细胞间隙变大但未完全脱落时，加入2-3 ml完全培养基以终止消化。

• 轻轻混匀N2a细胞悬液，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用新的完全培养基重悬N2a细胞，将细胞均匀分配到新的培养瓶中，传代比例一般为1:2至1:4。

• 补充适量的完全培养基，并将培养瓶置于培养箱中继续培养N2a细胞。

培养基更换

• 换液周期:每2-3天更换一次N2a细胞的培养基。

• 小心吸去旧的培养基，确保操作过程中不损伤N2a细胞层。

• 加入新鲜的完全培养基，轻轻摇动培养瓶，使N2a细胞均匀分布。

注意事项

• 不同品牌的胰酶可能需要不同的消化时间，应根据实际情况进行调整，以确保N2a细胞的完整性。

• 定期观察N2a细胞的形态和生长状态，确保无污染。如果发现N2a细胞生长状态不佳，应及时检查培养基成分和培养环境。

• 传代时操作应轻柔，避免对N2a细胞造成损伤。

细胞冻存

• 当N2a细胞密度达到80%-90%时，可进行细胞冻存。

• 用无血清冻存液重悬N2a细胞。

• 将N2a细胞悬液分装至冻存管中，逐步降温至-80℃，随后转移至液氮罐中长期保存。