DMS114细胞系是一种人源小细胞肺癌（SCLC）细胞系，最初从一名68岁未接受过治疗的白人男性患者的纵隔活检样本中分离。DMS114细胞系是由美国国家癌症研究所（NCI）的模式识别与分类系统实验室（PMCL）建立，具有高度增殖能力和快速生长的特点，是进行小细胞肺癌研究的重要实验材料。广泛应用于小细胞肺癌的药物筛选和生物学研究中，特别是临床前药物开发和疗效评估研究。

DMS114细胞系早期传代过程中曾受到牛支原体（Acholeplasma laidlawii）的污染，后来通过抗血清和卡那霉素治疗得以清除。在冷冻保存前，已确认支原体污染得到有效控制。

DMS114细胞特性特征

分子表达特征

• 表达EGF（表皮生长因子）和CR3补体

• 表达Leu 7、My23和CD11b等标记物

• 表达HLA I类和II类抗原

• 基因表达：促肾上腺皮质激素；农民；胰高血糖素；17-β-雌二醇；催产素-神经生理学

其他特征

• 污染：早期传代时曾受到牛支原体（laidlawii Acholeplasma）污染,后经过治疗

• 致瘤性：在皮下接种10^7个细胞的裸鼠中,肿瘤在21天内以100%的频率发展

• 药物敏感性：表现出对多种化学治疗药物（如顺铂、依托泊苷）的敏感性

• 应用：广泛应用于小细胞肺癌的药物筛选和生物学特性研究

DMS114细胞参数表

DMS114人小细胞肺癌细胞培养教程

DMS114细胞复苏

• 在无菌条件下准备一个新的100mm培养皿，加入12mL预热至37℃的培养基。推荐使用DMEM/F-12或RPMI-1640培养基，并添加10%胎牛血清（FBS），以促进DMS114细胞的复苏。

• 确保所有操作均在无菌环境下进行，佩戴无菌手套和适当的防护装备，以防止DMS114细胞在复苏过程中受到污染。

• 从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存的DMS114细胞冻存管。

• 将冻存管迅速放入37℃的水浴中，轻轻摇动冻存管，使其均匀解冻。整个过程应在1-2分钟内完成，以确保DMS114细胞的活性不受温度波动的影响。

• DMS114细胞完全解冻后，立即将细胞悬液转移到准备好的培养皿中。为确保DMS114细胞均匀分布，可以轻轻顺时针旋转培养皿。

• 将培养皿放入37℃、5% CO₂的培养箱中，静置过夜。次日更换培养液，以去除解冻过程中可能产生的DMS114细胞碎片和DMSO。

• 观察DMS114细胞的生长情况，通常在2-4天内，DMS114细胞会达到80-90%的汇合度。

DMS114细胞传代

• 待DMS114细胞达到适当的汇合度（通常为80-90%）时，首先吸除旧的培养基，并用无钙镁磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤DMS114细胞两次，以去除残留的血清和其他培养基成分。

• 向培养皿中加入2mL 0.25%胰酶-0.02% EDTA溶液，轻轻晃动培养皿，使溶液均匀覆盖DMS114细胞。

• 在显微镜下观察DMS114细胞，待DMS114细胞开始轻微脱落时，迅速吸除大部分胰酶，仅保留约0.5mL继续消化。将培养皿放回培养箱中约1分钟，确保DMS114细胞完全脱落。

• 向培养皿中加入6mL预热的培养基，轻轻吹打使DMS114细胞均匀悬浮。将DMS114细胞悬液转移至15mL离心管中，并以1000rpm离心5分钟。

• 离心后弃去上清液，加入适量新鲜培养基重悬DMS114细胞。按照1:2或1:3的比例将DMS114细胞接种到新的培养皿中，并放入培养箱中继续培养。

DMS114细胞冻存

• 制备冻存液，使用90%的胎牛血清（FBS）与10%的二甲基亚砜（DMSO）混合。确保冻存液充分混合均匀，以便DMS114细胞能够在冻存过程中保持活性。

• 在DMS114细胞达到适宜的汇合度并完成传代操作后，收集DMS114细胞悬液。离心后去除上清，使用3mL冻存液重悬DMS114细胞。

• 将重悬后的DMS114细胞分装到多个冻存管中，每管约1mL。确保冻存管标记清晰，包括“DMS114细胞”名称、传代次数和冻存日期。

• 将冻存管放入程序降温盒中，以-1℃/分钟的速度逐步降温至-80℃。此后，将DMS114细胞冻存管转移至液氮罐中长期保存。

注意事项

• 操作过程中应严格遵循无菌技术，避免DMS114细胞污染。

• 复苏DMS114细胞时，应避免冻存管在解冻过程中暴露于较大温差环境中，以防冻存管破裂。

• DMS114细胞培养期间，定期观察细胞形态和生长状态，必要时及时更换培养液。