RAG小鼠肾腺癌细胞系是一种来源于患有肾腺癌的BALB/c小鼠的细胞系。RAG细胞系是从小鼠肾脏组织中分离，并经过克隆筛选，最终获得了不可逆的8-氮杂鸟嘌呤抗性（HPRT-、HGPRT-）克隆。

RAG小鼠肾腺癌细胞呈现变形虫样的形态，通常以贴壁生长的方式繁殖。RAG细胞系属于Renal-2a细胞系的克隆，具有重要的生物学特性和研究价值。

RAG细胞特性特征

• 基因表达：RAG细胞系表达肾特异性酯酶-2。

• 病毒检测：RAG细胞系检测到鼠痘病毒呈阴性。

• 细胞内特征：RAG细胞内可能含有较多的黑色颗粒，传代过程中可能会有部分颗粒释放到培养基中，需要注意及时清除。

RAG小鼠肾腺癌细胞参数表

RAG小鼠肾腺癌细胞培养教程

RAG细胞复苏

• 准备完全培养基： 使用已优化的RAG细胞专用培养基。确保培养箱预热至37°C。

• 解冻RAG细胞： 将RAG细胞冻存管从液氮中取出，立即放入37°C水浴中，轻轻摇动以加速解冻，通常1-2分钟即可完成。

• 稀释与离心： 将解冻后的RAG细胞悬液转移至含有4-6 mL培养基的离心管中，轻轻混匀。以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 重悬与培养： 用5-10 mL培养基重悬RAG细胞，将其转移至培养瓶中，并将培养瓶放入37°C的培养箱中，观察RAG细胞贴壁情况。

RAG细胞培养

• 传代时间点： 当RAG细胞密度达到70%-80%时进行传代。

• 细胞洗涤与消化： 去除旧培养基，使用PBS洗涤RAG细胞，然后加入0.25%胰酶消化，直至RAG细胞脱落。

• 离心与重悬： 消化后，以1000 rpm离心5分钟，去除胰酶，上清用完全培养基重悬RAG细胞。

• 分瓶： 将重悬的RAG细胞分配到新培养瓶中，每瓶接种1-2 mL RAG细胞悬液。

RAG细胞观察与维护

• 状态监测： 定期通过显微镜观察RAG细胞形态，检查是否有污染或死亡现象。

• 培养基更换： 每2-3天更换RAG细胞培养基，去除代谢废物，提供新鲜营养。

• 传代频率： 当RAG细胞密度达到70%-80%时进行传代，遵循上述传代步骤。

关键注意事项

• 细胞内黑色颗粒： RAG细胞中可能存在较多黑色颗粒，传代时应注意清除培养基中的细胞外碎片。

• 无菌操作： 始终保持无菌环境，避免RAG细胞污染。

RAG细胞培养基的特殊要求

• 培养基成分：基础培养基： MEM基础培养基，445 mL+胎牛血清： 50 mL+抗生素： 青霉素-链霉素，5 mL

• pH控制： RAG细胞培养基的pH值应维持在7.3±0.2。

• 保存条件： RAG细胞培养基应避光保存于2℃～8℃，期限为2个月；长期保存可在-20℃避光保存6个月。