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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 小鼠细胞系 > TtT/GF细胞(小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞)
产品名称:TtT/GF细胞(小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞)
产品详细说明
  • 来源:垂体瘤;C57BL/6N x C3H/2N
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM/F12+10% HS+2.5% FBS+2ng/mL bFGF+1% P/S
  • 其他:FGF依赖性。GFAP阳性。S-100阳性。

TtT/GF细胞(小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞)是由井上健司教授团队于1996年从C57BL/6N和C3H/2N小鼠杂交产生的垂体瘤(具有促甲状腺激素分泌功能)中成功分离。TtT/GF细胞系作为一种永生化的细胞模型,来源于小鼠垂体,并表现出滤泡星状细胞的典型形态特征。

TtT/GF细胞特性

  • 依赖性:TtT/GF细胞系是FGF(成纤维细胞生长因子)依赖性细胞系,增殖和存活高度依赖于外源性FGF的供应.

  • GFAP阳性:细胞表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),这是一种神经胶质细胞的标志性分子.

  • S-100阳性:细胞也表达S-100蛋白,具有神经胶质细胞的某些特性.

  • 细胞因子分泌:TtT/GF细胞能够分泌白细胞介素-6(IL-6).

TtT/GF细胞参数表

细胞名称 TtT/GF细胞(小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞)
种属 小鼠
细胞类型 肿瘤细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长特性 贴壁细胞
组织来源 垂体瘤(C57BL/6N x C3H/2N)
培养基 DMEM/F12 + 10%马血清(HS)+ 2.5%胎牛血清(FBS)+ 2ng/mL FGF + 1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代方法 详见注意事项,需轻柔操作,避免过多气泡
冻存条件 冻存液:92%FBS+8%DMSO或92%完全培养基+8%DMSO;温度:液氮
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 消化并离心获得细胞沉淀后,加冻存液重悬,程序冻存后转入液氮
特异性标记物 GFAP阳性,S-100阳性
细胞因子分泌 能够分泌白细胞介素-6(IL-6)
注意事项 贴壁松散,操作轻柔;换液时需预热培养基;收货时大块脱落细胞团为正常现象

培养教程

TtT/GF小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞培养教程

 细胞复苏

  • 从液氮中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中,轻轻晃动直至冰晶完全融化。

  • 将融化的细胞悬液转移至含有10mL预温的完全培养基的离心管中。

  • 1000 rpm离心5分钟,弃上清,轻轻吹打重悬细胞。

  • 将细胞悬液转移至培养瓶中,置于培养箱中培养。

细胞传代

  • 当TtT/GF细胞生长达到70-80% confluency时进行传代。

  • 吸弃旧培养基,加入适量胰酶消化,直至细胞变圆浮起。

  • 加入新鲜培养基终止消化,轻轻吹打制成细胞悬液。

  • 将细胞悬液按一定比例分至新的培养瓶中。

细胞冻存

  • 收集对数生长期的TtT/GF细胞,离心后弃上清。

  • 加入冻存液(如含80% FBS和20% DMSO的冻存液),轻轻混匀。

  • 将细胞悬液分装到冻存管中,置于-80℃冰箱过夜,然后转移至液氮中长期保存。

注意事项

  • FGF的重要性: FGF是维持TtT/GF细胞生长的关键因子,必须加入培养基中。

  • 细胞贴壁性: TtT/GF细胞贴壁相对较弱,操作时应轻柔,避免过度吹打。

  • 无菌操作: 所有操作均应在无菌条件下进行,防止污染。

  • 冻存液配制: 冻存液的配制应严格按照标准操作,避免细胞损伤。

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