S-180肿瘤细胞来源于昆明小鼠的腹水瘤，创建于1959年。S180肿瘤细胞保留了肉瘤的肿瘤特性，广泛用于肿瘤发生机制的研究等。在体外培养时，S-180细胞通常表现为圆形，并具有半贴壁半悬浮的生长特性。

通常，S-180细胞通过昆明小鼠腹水进行传代。在实验中，将1.0x10^6个S-180细胞注射入小鼠腹腔，经过10天后，在无菌条件下抽取腹水，随后用PBS稀释并计数，最后用于腹腔内的再接种以进行传代培养。S180肿瘤细胞系经过鼠痘病毒检测确认为阴性，可以用于3D细胞培养实验。

S-180肿瘤细胞－小鼠腹水瘤细胞参数表

S-180小鼠腹水瘤细胞培养教程

S180细胞复苏

• 解冻S180细胞：将含有1mL S180细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速解冻，轻轻摇晃至完全融化。

• 混合培养基：将S180细胞悬液加入4mL培养基中，轻轻混匀。

• 离心处理：在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液。

• 补加培养基：加入1-2mL培养基，吹打混匀S180细胞。

• 培养过夜：将S180细胞悬液转移至培养瓶中，培养过夜（或加入10cm培养皿中，加入约8mL培养基）。

• 换液检查：第二天换液并检查S180细胞密度。

S180细胞传代

• 准备工作：当S180细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

• PBS清洗：弃去培养上清液，用不含钙、镁的PBS清洗S180细胞1-2次。

• 消化S180细胞：加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 终止消化：观察到大部分S180细胞变圆并脱落后，轻敲几下培养瓶，加入少量培养基终止消化。

• 离心与补加：将S180细胞悬液转移至离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基，吹打混匀。

• 分瓶培养：按1:2的比例将S180细胞悬液分至新的含8mL培养基的培养皿或培养瓶中。

S180细胞冻存

• S180细胞状态检查：当S180细胞生长良好时，可以进行冻存。

• 弃去培养基：弃去培养基，用PBS清洗S180细胞。

• 消化与收集：使用消化液收集S180细胞，离心后弃去上清液。

• 准备冻存液：配制55%基础培养基、40%胎牛血清（FBS）和5%DMSO的冻存液。

• 冻存：将S180细胞悬液分装至冻存管中，置于液氮中保存。

培养条件和注意事项

• 培养基：通常使用RPMI-1640或DMEM培养基，添加10%的胎牛血清（FBS）和1%的青霉素/链霉素（P/S）。

• 培养环境：确保培养环境为95%空气和5% CO2，温度为37℃。

• S180细胞密度：传代时确保S180细胞密度在80%-90%。

• 污染检查：收到S180细胞后，检查是否漏液或污染，必要时联系供应商。

• 传代频率：建议每周传代2次，比例为1:2至1:6。

实验过程中的传代

• 在实验中，将1.0x10^6个S180细胞注射入昆明小鼠的腹腔内，10天后，在无菌条件下抽取腹水，用PBS稀释后计数，再次用于腹腔内的接种以进行传代培养。

• S180细胞系经过鼠痘病毒检测确认阴性，可以用于3D细胞培养实验。

• S180细胞在体外培养时，表现为半贴壁半悬浮生长特性，具有显著的肿瘤原性