PC-14细胞系最初于1989年在日本的理研生物资源中心建立，起源于一位男性肺腺癌患者的肿瘤组织。由于当时的误识，该细胞系最初被标记为PC-14。然而，通过后续的短串联重复序列（STR）DNA分析，发现pc14细胞系与另一种源自人类肺腺癌的分化型细胞系PC-9相同。鉴于此，pc14细胞的名称随后被更改为PC-9，以反映其真实的身份。PC-9细胞系在肺腺癌研究中具有重要意义，并被广泛用于探讨癌症的病理机制以及评估药物的疗效。

PC14细胞系特性特征

• 生长：pc14细胞具有较强的增殖能力，适合用于各种实验研究。

• 基因组：pc14细胞表现出非整倍体和多倍体的特征，反映出基因拷贝数的增加和细胞增殖的失控。

• 生物标志物：pc14细胞表达与肺癌相关的多种生物标志物，如EGFR等。

• 信号通路：多种信号通路（如PI3K/Akt、MAPK等）可能被激活

PC14细胞系参数表

PC14人肺癌细胞系培养教程

PC14细胞复苏

• 将PC14细胞冻存管从液氮中取出后，立即放入37°C水浴中，轻轻摇动以加速解冻，确保解冻过程迅速完成，以减少细胞损伤。

• 解冻后，迅速将1 mL PC14细胞悬液转移至装有4 mL完全培养基（RPMI 1640，含10% FBS和2 mM谷氨酰胺）的离心管中。

• 在1000 RPM下离心4分钟，去除上清液，保留PC14细胞沉淀。

• 向PC14细胞沉淀中加入1-2 mL完全培养基，轻轻吹打以使细胞悬浮均匀，然后将悬浮液转移至T25培养瓶中。

• 将培养瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中，培养过夜，以便PC14细胞贴壁生长。

PC14细胞传代

• 次日检查PC14细胞状态，当细胞覆盖面积达到80%-90%时，进行传代操作。

• 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗涤PC14细胞1-2次，以去除残留培养基。

• 加入1 mL胰酶-EDTA溶液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），将培养瓶放回培养箱中消化1-2分钟，待PC14细胞变圆且松散脱落。

• 轻轻敲打培养瓶的侧壁，加入少量含血清的培养基终止消化反应。

• 补加6-8 mL培养基，轻轻混匀后，在1000 RPM下离心4分钟，去除上清液。

• 用1-2 mL培养基重悬PC14细胞，按1:2的比例分配到新的培养瓶中，并补加8 mL新鲜培养基。

PC14细胞冻存

• 当PC14细胞生长状态良好时，弃去培养基，用PBS清洗细胞1-2次。

• 加入1 mL胰酶消化，待PC14细胞脱落后，加入1 mL含血清的培养基终止消化。使用血球计数板计数PC14细胞数量。

• 在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。

• 用血清重悬PC14细胞，并按10%的终浓度加入DMSO，确保细胞浓度不低于1x10^6 cells/mL。

• 将重悬的PC14细胞悬液分装到冻存管中，放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱中预冻2小时后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 污染检测：定期检测PC14细胞是否有支原体或其他污染。

• 传代频率：保持固定的传代频率和PC14细胞密度，避免传代过迟或过早。

• 操作卫生：培养和传代PC14细胞过程中应注意无菌操作，避免交叉污染。