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产品名称:EL-4-B5细胞(小鼠胸腺淋巴瘤细胞)
产品详细说明
  • 来源:胸腺
  • 细胞特征:半贴半悬 ,淋巴母细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:特殊性质:EL-4-B5是溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体

EL-4-B5小鼠胸腺淋巴瘤细胞是EL4小鼠胸腺瘤的亚克隆,EL4B5细胞系是一种溴脱氧尿苷的抗性突变体,可作为B细胞的饲养层,用于人单克隆抗体的产生。

EL-4-B5细胞是通过甲烷磺酸乙酯处理产生IL-2的EL-4小鼠胸腺瘤细胞后,突变筛选获得。突变后发现了一种胸苷激酶缺陷且对瓦巴因有抗性的克隆EL-4 BurOUr 6.1,这些细胞能通过细胞接触激活小鼠和人类的B细胞,经过亚克隆获得了EL-4-B5细胞系,它能够有效地激活B细胞,促进其增殖、分化并诱导抗体分泌。

EL-4-B5细胞特性特征

  • 增殖能力:EL4B5细胞具有较高的增殖率,可以承受较大比例的传代(如1:10)

  • 突变特性:溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体、胸苷激酶缺陷(thymidine kinase-deficient)、乌阿巴因抗性(ouabaine-resistant)

  • 饲养层功能:EL4B5细胞 可作为饲养层细胞(feeder cell)用于B细胞培养

  • EL4B5细胞可用于产生人源单克隆抗体

  • 基因特征:IL-2产生: 原始EL-4细胞系能产生IL-2,但EL-4-B5的IL-2产生能力需进一步确认

  • 基因突变: 经过乙基甲烷磺酸酯(ethyl-methane-sulfonate)诱导突变

  • EL4B5细胞具备半贴壁半悬浮生长的特点,其中悬浮状态的细胞表现出更健康的生长

  • EL-4-B5细胞系提供了一种从用荧光VLP选择的单个抗原特异性B细胞克隆产生重组人mAb的方法,并且可以用于产生许多其他病毒的人mAb,这些病毒的蛋白质可以自组装成VLP。

EL-4-B5细胞参数表

细胞名称 EL-4-B5细胞(小鼠胸腺淋巴瘤细胞)
同义词 EL-4 B5; EL4-B5; EL4B5
物种组织来源 小鼠 (Mus musculus)  胸腺
细胞类型 淋巴细胞
形态 淋巴母细胞样,半贴壁半悬浮培养
疾病来源 小鼠胸腺淋巴瘤
原始细胞系 EL-4小鼠胸腺瘤细胞系
突变特性

溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体,胸苷激酶缺陷,

乌阿巴因抗性

生物安全等级 2
培养基 RPMI-1640 / 10% 胎牛血清 (FBS)
添加剂 1% 青霉素-链霉素,2mM 谷氨酰胺,10mM HEPES,0.056mM β-巯基乙醇
培养条件 37°C, 5% CO2, 95% 空气,湿度70%-80%
传代方式 无需酶处理,直接收集细胞
推荐传代比例 1:2 (首次传代)
冻存液 90% 血清, 10% DMSO
细胞数量 >1x10^6 细胞/瓶
包装规格 T25瓶或1mL冻存管
应用 仅供科研使用,适用于免疫学研究、肿瘤生物学、药物筛选和抗体生产
支原体测试 已测试
IL-2 产生 原始EL-4细胞系能产生IL-2,但EL-4-B5的IL-2产生能力需进一步确认
其他特性

可作为饲养层细胞用于B细胞培养,强烈激活B细胞,诱导B细胞增殖、分化

和抗体分泌

培养教程

EL4B5小鼠胸腺淋巴瘤细胞培养教程

细胞复苏

  • 在37°C水浴中快速解冻冻存的EL4B5细胞冻存管。

  • 将EL4B5细胞悬液转移到含4-6mL完全培养基的离心管中。

  • 1000RPM离心3-5分钟,弃去上清液。

  • 用完全培养基重悬EL4B5细胞。

  • 将细胞悬液转移到含6-8mL完全培养基的培养瓶中,37°C培养过夜。

细胞传代

  • EL4B5细胞为半贴壁半悬浮培养。

  • 不需要酶处理,直接收集培养基中的悬浮细胞。

  • 轻拍培养瓶收集贴壁EL4B5细胞。

  • 首次传代建议比例为1:2。

  • 保持EL4B5细胞密度低于10^6细胞/mL。

培养注意事项

  • 悬浮状态的EL4B5细胞通常更健康。

  • 当EL4B5细胞密度低于60%时,需收集悬浮细胞离心后重悬,再回加到原培养瓶中。

  • EL4B5细胞生长至70%-90%时进行传代。

  • 传代时需收集培养基中的悬浮细胞。

冻存

  • 冻存液:90% FBS + 10% DMSO

  • 细胞密度:>1x10^6细胞/mL

  • 缓慢降温后转入液氮保存EL4B5细胞。

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