CMT-93是源自小鼠直肠组织的多倍体癌细胞系，上皮细胞形态，常用于结肠癌和直肠癌的研究。CMT93细胞系从一只19个月大的雄性C57BL/1CRF小鼠分离出来，该小鼠在18个月内每周接受一次N-甲基-N-亚硝基脲（MAMA）的腹膜内注射，最终诱发多倍体癌。

CMT93细胞特性特征

• 抗原表达：表达H-2b抗原

• 致瘤性：CMT93细胞在裸小鼠中具有高度致瘤性、皮下接种10^7个细胞后，21天内以100%的频率（5/5）形成肿瘤

• 生长特性：培养1个月后，CMT93细胞形成腺泡和连接复合体、在裸鼠中可产生大肿瘤（6×10^6个细胞接种物）

• 分子特征：鼠痘病毒呈阴性

CMT93细胞参数表

CMT93小鼠直肠多倍体癌细胞系培养教程

CMT-93细胞复苏

• 将冻存管在37°C水浴中快速解冻，约1-2分钟。

• 将解冻后的CMT-93细胞悬液转移至含有4mL预热培养基的离心管中。

• 以1000rpm离心4分钟。

• 弃去上清，用1-2mL新鲜培养基重悬CMT-93细胞。

• 将重悬的CMT-93细胞转移到T25培养瓶中，补充至总量6-8mL培养基。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO2培养箱中过夜培养。

• 次日更换新鲜培养基，去除死CMT-93细胞。

CMT-93细胞传代

• 当CMT-93细胞密度达到70-80%时进行传代。

• 弃去旧培养基，用PBS轻柔洗涤CMT-93细胞1-2次。

• 加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化2-3分钟。

• 显微镜下观察CMT-93细胞脱落情况。

• 加入等体积含血清的培养基终止消化。

• 以1000rpm离心4分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬CMT-93细胞。

• 按1:2至1:6的比例将CMT-93细胞接种到新的培养瓶中。

• 每3-4天传代一次。

CMT-93细胞冻存

• 制备冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO。

• 收集对数生长期的CMT-93细胞。

• 调整CMT-93细胞密度至≥1 x 10^6 cells/mL。

• 将CMT-93细胞悬浮在冻存液中。

• 分装至冻存管中，每管1mL。

• 使用程序降温盒在-80°C冰箱中缓慢降温。

• 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 定期观察CMT-93细胞形态和生长状态，确保CMT-93细胞健康。

• 保持无菌操作，防止污染。

• 避免CMT-93细胞过度生长或密度过低，以确保实验数据的可靠性。

• 定期进行CMT-93细胞特性鉴定，如短串联重复序列 (STR) 分析，确保CMT-93细胞系的稳定性和准确性。