CTLL-2细胞（小鼠T淋巴细胞）

CTLL-2细胞是一株源自C57BL/6小鼠的细胞毒性T淋巴细胞克隆。CTLL-2细胞依赖于白细胞介素-2（IL-2）进行生长，常用于测定IL-2的生物活性。

CTLL-2细胞是依赖IL-2的细胞毒性T细胞株，在体外培养时以悬浮状态生长，形态上类似于淋巴母细胞。CTLL-2细胞在免疫学研究中广泛应用，尤其是在研究T细胞功能和IL-2相关机制方面。

可以使用含有Con A的T-STIM（来自Becton Dickinson的大鼠IL-2培养补充剂）进行培养，或者按照产品说明制备大鼠生长因子。新鲜制备的大鼠生长因子通常能更有效地促进细胞生长。

大鼠生长因子的制备方法：

从体重约200克的雌性Sprague-Dawley大鼠中取出脾脏。
将脾脏粗碎后通过60号筛。
用RPMI 1640培养基洗涤细胞2-3次。
将细胞重新悬浮在含有1%热灭活胎牛血清、0.05 mM 2-巯基乙醇、15 mM HEPES、100单位/ml青霉素、100 mg/ml链霉素和1.0µg/ml刀豆球蛋白A的RPMI 1640培养基中，浓度为1-1.5 x 10^6个活细胞/ml。
在37°C的CO2培养箱中培养48小时。
在4°C下以16000 x g离心10分钟，收获上清液并用0.22微米的膜进行过滤消毒。
将生长因子储存于-60°C，避免冻融循环。大鼠生长因子在4°C下可保存一个月，并保持其活性。使用前将其添加到培养基中。
通常，每个脾脏可产生100-200 ml的大鼠生长因子，预计每个脾脏有1-2 x 10^8个细胞。

细胞名称	CTLL-2细胞（小鼠T淋巴细胞）
别称	CTLL-2；CTLL2；CTLL(2)；小鼠T淋巴细胞
种属来源	小鼠（Mus musculus）C57BL/6
组织来源	T细胞
细胞类型	细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocytes）
生物安全等级	1级
支原体检测	无
保藏机构	ATCC; TIB-214 DSMZ; ACC-27 ECACC; 93042610
病毒检测	鼠痘病毒呈阴性
生长特性	悬浮生长
细胞形态	淋巴母细胞样
培养基	RPMI-1640＋10% FBS＋100IU/ml IL-2或mouse IL-2＋1% P/S
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
传代密度	细胞密度达80%-90%时进行传代
传代比例	建议1:2传代
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
受体表达情况	白细胞介素2（IL-2），表达
特别注意	1. 复苏第一、二天死亡率可能下降到10%，一般在第四天恢复正常
	2. 需及时传代，密度超过0.5M/ml，24小时后细胞会大量死亡
	3. 最高养殖时间为4个月，约传代50次
表达标记	白细胞介素2（IL-2），表达
应用	测定IL-2活性，免疫学研究，抗病毒和抗肿瘤研究

IL-2 添加：实验室常备 IL-2，发现CTLL-2细胞状态不好时（如散在细胞变多、细胞不生长），以100 U/ml浓度添加 IL-2，培养2-3天后CTLL-2细胞状态会改善。
细胞密度：需及时传代，CTLL-2细胞密度超过0.5 M/ml后，24小时内细胞会大量死亡。
培养时间：CTLL-2细胞的最长培养时间为4个月，约传代50次。
冻存密度：应达到6-10 M/管。