A20细胞是一种源自一只老年BALB/cAnN小鼠（自发网状细胞肿瘤）的B细胞淋巴瘤细胞系，首次于1979年被鉴定。A20细胞具有二倍体特征，其染色体数目在33到38之间，模态数为37。

A20细胞系悬浮生长、细胞呈球形，表面光滑，中心部分较暗，而边缘较明亮。

A20细胞特性特征

• 免疫球蛋白表达：表面免疫球蛋白（sIg+）的表达水平依赖于培养条件。在Click培养基中生长时，表面免疫球蛋白表达很少；然而，在RPMI 1640培养基中生长时，表达大量表面免疫球蛋白。

• 抗原呈递：A20细胞可以呈递同种异体抗原和蛋白质抗原，适合作为转染宿主用于研究抗原呈递机制。

• 基因表达：表达I-A+（MHC II类分子）和表面免疫球蛋白（sIg+）。

• 标记表达：表达Fc受

• 致瘤性：A20细胞具有致瘤性

• 病毒检测：A20细胞鼠痘病毒呈阴性

A20细胞参数表

A20小鼠B细胞淋巴瘤细胞培养教程

A20细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的A20细胞。

• 在37℃水浴中快速解冻（约1-2分钟）。

• 将A20细胞悬液缓慢转移到含有6-9 mL完全培养基的离心管中。

• 1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用新鲜完全培养基重悬A20细胞，转移到培养瓶中。

A20细胞传代

• 每2-3天观察A20细胞生长状况。

• 当A20细胞密度达到1×10^6 cells/mL时进行传代，建议传代比例为1:2（首次传代）。

• 收集A20细胞悬液，1000 rpm离心5分钟。

• 弃上清，用新鲜完全培养基重悬A20细胞。

• 将A20细胞分装到新的培养瓶中。

A20细胞冻存

• 收集对数生长期的A20细胞。

• 1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用含5/10% DMSO的完全培养基重悬A20细胞。

• 将A20细胞悬液分装到冻存管中。

• 使用程序降温盒，将A20细胞缓慢降温至-80℃。

• 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 定期检查A20细胞的形态和生长状况，保持无菌操作，避免污染。

• 不要让A20细胞过度生长或密度过高，定期进行细胞鉴定，确保A20细胞特性未发生改变。

A20细胞生长监测

• 显微镜观察：使用倒置显微镜定期观察A20细胞形态和密度。A20细胞悬浮生长，形态为球形，表面光滑。

• 细胞计数：每2-3天进行细胞计数，记录A20细胞密度变化，保持A20细胞密度在1×10^5-1×10^6 cells/mL之间。

• 培养基颜色：观察培养基颜色变化，培养基变黄表明需要更换新鲜培养基。

• 细胞活力：使用台盼蓝染色法检测A20细胞活力，活A20细胞不着色，死A20细胞呈蓝色。

• 生长曲线：绘制A20细胞生长曲线，监测A20细胞的对数生长期和平台期。

• 倍增时间：计算A20细胞倍增时间，正常A20细胞的倍增时间约为48-72小时。

• 细胞聚集：观察是否有A20细胞聚集现象，过度聚集可能影响A20细胞生长。