3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞最初于1962年从小鼠胚胎中分离出来。3T6细胞具有超三倍体的细胞系，其中30%的细胞具有68条染色体，中倍性较高的细胞比例为2.4%。

3T6细胞具有接触抑制特性，在融合的单层培养条件下可以达到40000个细胞/cm²。3T6细胞适合在塑料培养瓶中生长，但在某些类型的玻璃表面上生长效果不佳。3T6细胞饱和密度约为50000个细胞/cm²。

3T6细胞特性特征

• 分泌能力：3T6细胞能分泌胶原质和透明质酸。

• 基因表达：溶血磷脂酰胆碱（lyso-PC）通过蛋白激酶c-非依赖性途径诱导AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性（JNK1）、角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性

• 病毒易感性：对多瘤病毒敏感；对SV40病毒敏感

• 检测结果：经检测，3T6细胞鼠痘呈阴性

3T6小鼠胚胎成纤维细胞参数表

3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞培养教程

细胞复苏

• 将含有1mL3T6细胞悬液的冻存管在37°C水浴中快速解冻（约1-2分钟）。

• 解冻后，将3T6细胞悬液转移到含有4mL预热培养基的离心管中。

• 在1000RPM条件下离心4分钟。

• 弃去上清液，用1-2mL新鲜培养基重悬3T6细胞。

• 将3T6细胞悬液转移到准备好的培养瓶中，加入适量培养基。

传代方法

• 当3T6细胞融合度达到80-90%时进行传代。

• 用PBS轻轻冲洗细胞层1-2次。

• 加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA溶液，在37°C孵育2-3分钟。

• 轻轻拍打培养瓶，观察3T6细胞脱落情况。

• 加入含血清的培养基终止消化。

• 收集3T6细胞悬液，1000RPM离心4分钟。

• 弃去上清液，用新鲜培养基重悬3T6细胞。

• 按1:3到1:6的比例接种到新的培养瓶中。

细胞密度控制

• 融合密度：约40,000个3T6细胞/cm²。

• 饱和密度：约50,000个3T6细胞/cm²。

• 接种密度可根据实验需求调整，但不要过低，以免影响3T6细胞生长。

细胞冻存

• 使用10% DMSO + 90%胎牛血清的冻存介质。

• 缓慢降温至-80°C，然后转移至-196°C液氮中长期保存。