HFL1人胚肺成纤维细胞是一种从健康白人胎儿肺组织中分离的细胞系，是一种有限传代的细胞系，来源于16周大的男胎儿肺组织。

HFL1细胞系具备正常的核型，通常在传代10次以内具有良好的生长性，并且在适宜条件下能够稳定传代至46代。HFL1细胞以贴壁生长为主，主要用于各类科研研究，尤其在毒理学领域应用广泛。文献中报道了HFL1细胞存在一定的细胞遗传不稳定性。

STR鉴定及相关

HFL1细胞特性特征

• 核型：HFL1细胞具有正常的二倍体核型。

• 同工酶：HFL1细胞表达同工酶G6PD，B型。

• 基因表达：HFL1细胞系在研究中常用于分析与肺部疾病、细胞增殖和分化相关的基因表达

HFL1细胞参数表

HFL1人胚肺成纤维细胞培养教程

HFL1细胞复苏

• 配制HFL1细胞完全培养基，使用F12K基础培养基，加入10%胎牛血清和1%抗生素（如青霉素-链霉素混合液）。

• 在37℃水浴中预热5ml HFL1细胞的完全培养基。

• 从液氮或-80℃冰箱中取出冻存的HFL1细胞管，立即放入37℃水浴中轻轻摇晃，快速解冻（约1分钟内完成）。

• 将解冻后的HFL1细胞悬液转移至15ml离心管中，加入预热的完全培养基，轻轻混匀。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液，保留HFL1细胞沉淀。

• 用2ml完全培养基轻轻重悬HFL1细胞沉淀。

• 将重悬的HFL1细胞转移至T25培养瓶中，标记培养瓶。

• 将HFL1细胞培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。

• 24小时后，检查HFL1细胞贴壁情况。如未贴壁HFL1细胞较多，应弃去旧培养基，换上新鲜预热的完全培养基。

HFL1细胞传代

• 当HFL1细胞生长至80%-90%汇合度时，开始传代操作。

• 吸弃培养基，加入1ml无菌PBS润洗HFL1细胞一次，以去除残余培养基及血清。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻摇动培养瓶，室温孵育2-5分钟，观察HFL1细胞脱落情况。

• 加入2-3ml完全培养基终止胰酶反应。

• 将HFL1细胞悬液转移至离心管中，1000rpm离心5分钟，去除上清液。

• 用适量完全培养基重悬HFL1细胞，按1:2或1:3的比例（如1ml细胞悬液加入2-3ml培养基）。

• 将重悬的HFL1细胞转移至新的培养瓶中，并做好标记。

• 将HFL1细胞培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。

HFL1细胞冻存

• 配制HFL1细胞冻存液，使用90%胎牛血清和10% DMSO，确保现用现配。

• 按照传代步骤收集HFL1细胞，离心后弃去上清液。

• 用HFL1细胞冻存液重悬HFL1细胞，通常以1x10^6 HFL1细胞/ml的浓度进行冻存。

• 将重悬的HFL1细胞分装至冻存管中，标记清楚。

• 将HFL1细胞冻存管先置于-80℃冰箱中过夜，随后转入液氮中长期保存。

注意事项

• HFL1细胞培养基更换：建议每2-3天更换一次HFL1细胞培养基，并定期观察HFL1细胞状态。

• HFL1细胞观察：应使用显微镜定期检查HFL1细胞形态和生长情况。

• 无菌操作：在整个HFL1细胞培养过程中保持严格的无菌操作，以防止污染。