TCMK-1细胞（小鼠肾小管上皮细胞）

TCMK-1细胞是一种小鼠肾小管上皮细胞系，源自C3H/Mai小鼠的肾小管组织，于1963年建立。tcmk1细胞系通过SV40病毒转化而成，具有较高的稳定性和生长能力。
TCMK-1细胞呈现上皮细胞样，细胞形状多为多边形或长条形，大小约为15-30微米，胞质丰富，核大而圆，核仁明显。tcmk1细胞系以贴壁生长为特征，生长迅速，传代周期约为24-48小时。
TCMK-1细胞的染色体模态数为78，范围在64到157之间。所有细胞均显示2-6条具有次级收缩的着丝粒染色体，每个细胞有1-4条双臂染色体，且60%的细胞有一条或多条微小染色体。

TCMK-1细胞特性特征

tcmk1细胞表达H-2k抗原
表达多种特异性标志物，包括：Ksp-cadherin、AQP1, AQP2, AQP3, AQP4、NHE3、Na-K-ATPase；
约2%的细胞对SV40病毒抗原呈阳性，但病毒不可恢复
tcmk1细胞对水疱性口炎病毒、格拉斯哥（印第安纳州）、人脊髓灰质炎病毒1型敏感
经检测，tcmk1细胞鼠痘病毒呈阴性
tcmk1细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤

TCMK-1细胞参数表

细胞名称	TCMK-1细胞（小鼠肾小管上皮细胞）
细胞别称	TCMK-1; TCMK1; Transformed C3H Mouse Kidney-1
细胞来源	C3H/Mai小鼠肾小管上皮
细胞类型	上皮细胞
转化方法	SV40病毒转化
形态特征	上皮样，多边形或长条形，15-30微米
生长特性	贴壁生长
生物安全等级	1
供应限制	仅供科研使用
培养基	DMEM或MEM + 10%胎牛血清 + 1%青霉素-链霉素
培养环境	37°C，95%空气 + 5%二氧化碳
传代信息	比例1:2至1:3，密度80-90%，周期24-48h
储存温度	活细胞：培养箱；冻存管：液氮罐
抗原表达	H-2k
特异性标志物	Ksp-cadherin, AQP1, AQP2, AQP3, AQP4, NHE3, Na-K-ATPase
SV40抗原	2%细胞阳性，病毒不可恢复
病毒敏感性	水疱性口炎，人脊髓灰质炎病毒1型
鼠痘病毒	阴性
致瘤性	在免疫抑制小鼠中不致瘤
主要用途	肾脏疾病研究，药物筛选，毒性评价
保藏机构/货号	ATCC CCL-139; KCLB 10139; ZQ0814

培养教程

TCMK-1小鼠肾小管上皮细胞培养教程

TCMK-1细胞复苏

将冻存管内的1 mL TCMK-1细胞悬液在37℃水浴中快速解冻。
加入4 mL预热的完全培养基并轻轻混匀。
以1000 rpm离心3分钟，弃去上清。
用6-8 mL新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。
将TCMK-1细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中。
培养过夜后更换新鲜培养基，并检查细胞密度。

TCMK-1细胞传代

当TCMK-1细胞密度达到80%-90%时进行传代：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS洗涤TCMK-1细胞1-2次。
加入1-2mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液，使其覆盖所有TCMK-1细胞。
将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察TCMK-1细胞，当大部分细胞变圆并脱落时，加入少量培养基终止消化。
补加6-8 mL培养基并轻轻混匀。
以1000 rpm离心4分钟，弃去上清。
用新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。
按1:2至1:3的比例将TCMK-1细胞接种到新的培养瓶中。

日常维护

每2-3天更换一次培养基。
定期观察TCMK-1细胞形态和生长状况。
保持培养基pH在7.2-7.4之间。

TCMK-1细胞冻存

收集对数生长期的TCMK-1细胞。
制备冻存液（ 5% DMSO）。
调整TCMK-1细胞浓度至约5 x 10^5 cells/mL。
将TCMK-1细胞悬液分装到冻存管中，每管1 mL。
使用程序降温盒或细胞冻存容器，将TCMK-1细胞缓慢降温至-80℃。
24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

操作过程中保持无菌条件。
避免TCMK-1细胞过度消化，以维持细胞活力。
定期检测TCMK-1细胞是否有污染。
建议使用低代次TCMK-1细胞进行实验，以确保结果的可靠性。