Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞是一种经过基因改造的小鼠细胞系，衍生自Psi2细胞。Psi2 DAP细胞系通过插入重组逆转录病毒基因组（DAP）而获得。Psi2 DAP细胞能够生成一种载体，这种载体表达编码人胎盘碱性磷酸酶和新霉素抗性基因。Psi2 DAP细胞经常用于探究基因功能和细胞行为。

Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞特性特征

• 分子特征：含有插入的重组逆转录病毒基因组（DAP）、能够产生可感染小鼠细胞的载体

• 基因表达：表达人胎盘碱性磷酸酶转导载体、产生编码人胎盘碱性磷酸酶基因的载体、产生编码新霉素抗性基因的载体

• 功能特征：产生的载体可以感染小鼠细胞

• 被Psi2 DAP细胞产生的载体感染的细胞会表达组织化学可检测的碱性磷酸酶、表达的碱性磷酸酶可用作追踪细胞在体内命运的标记

• 生物安全特征：Psi2 DAP细胞可能产生辅助病毒，需要注意生物安全

Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞参数表

Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的Psi2-DAP细胞管，迅速放入37°C水浴中解冻，轻轻摇动以加速解冻过程。

• 解冻后立即将细胞悬液转移到含10 ml预热完全培养基的离心管中。

• 离心：以1000 rpm的速度离心5分钟，弃去上清液。

• 重悬细胞：加入新鲜培养基重悬Psi2-DAP细胞，确保细胞均匀分散。

• 接种：将重悬的Psi2-DAP细胞转移到T25培养瓶中，置于37°C，5% CO2的培养箱中培养。

细胞传代

• 准备传代：当Psi2-DAP细胞生长至80-90%汇合时，准备进行传代。

• 洗涤：用不含钙镁的PBS洗涤细胞，以去除旧的培养基。

• 消化：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，消化2-5分钟，轻轻摇动培养瓶以使Psi2-DAP细胞脱落。

• 中和：加入等体积的完全培养基以中和胰蛋白酶。

• 离心：以1000 rpm的速度离心5分钟，弃去上清液。

• 重悬细胞：加入新鲜培养基重悬Psi2-DAP细胞，确保细胞均匀分散。

• 接种：按1:2或1:3的比例将Psi2-DAP细胞接种至新的培养瓶中，继续培养。

细胞冻存

• 准备冻存液：使用90% FBS和10% DMSO的冻存液，或专用的非程序冻存液，以冻存Psi2-DAP细胞。

• 重悬细胞：将Psi2-DAP细胞按1×10^6 cells/ml的浓度重悬于冻存液中，分装到冻存管中。

• 冷冻：逐步降温至-80°C，随后转移至液氮中进行长期保存。

注意事项

• 确保所有操作在无菌条件下进行，以防止Psi2-DAP细胞污染。

• 定期检查Psi2-DAP细胞的生长状态，确保细胞健康。

• 使用前确保培养基和试剂均已预热至37°C。

其他特性

• 基因表达：Psi2-DAP细胞系生成的载体表达编码人胎盘碱性磷酸酶基因和新霉素抗性基因，这种碱性磷酸酶可用于组织化学检测。

• 标记功能：碱性磷酸酶作为细胞追踪的标记，能够监测Psi2-DAP细胞体内的动态变化。

• 载体产生：Psi2-DAP细胞产生的载体能够感染小鼠细胞，用于基因功能研究和病毒载体研究。

• 应用领域：基因功能研究、细胞追踪、逆转录病毒研究；仅限科研用途。