MH-S细胞系源自7周龄雄性BALB/c小鼠的肺泡巨噬细胞，经过SV40病毒转化获得。MH-S细胞系保留了肺泡巨噬细胞的多种特征，包括典型的巨噬细胞形态、粘附性、吞噬性、酯酶阳性以及过氧化物酶阴性。

MH-S细胞特性特征

• 表达特征：抗原表达：CD11b (Mac-1)、II类抗原 (I-A)、T抗原

• 表达标记：Fc受体

• 基因表达特征：表达白细胞介素-1 (IL-1)基因

• mhs细胞能够产生白细胞介素-1 (IL-1)，特别是在脂多糖（LPS）刺激下

• mhs细胞能够以细胞剂量依赖方式抑制体外噬菌斑形成细胞（PFC）反应

MH-S细胞参数表

MH-S小鼠肺泡巨噬细胞培养教程

细胞复苏

• 快速解冻冻存的MH-S细胞（约1分钟）。

• 将MH-S细胞悬液转移至含5 ml 预热完全培养基的15 ml离心管中。

• 以1000 rpm离心5分钟。

• 弃上清液，用2 ml 完全培养基重悬MH-S细胞。

• 将细胞悬液转移至T25培养瓶中。

• 放置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。

细胞传代

• 观察MH-S细胞的生长状态，当细胞密度达到70%-90%时进行传代。

• 收集培养基中的悬浮MH-S细胞。

• 用PBS轻轻冲洗贴壁MH-S细胞。

• 加入适量胰酶消化液，在37°C下消化2-3分钟。

• 添加等体积完全培养基终止消化。

• 收集MH-S细胞悬液，1000 rpm离心5分钟。

• 弃上清液，用新鲜完全培养基重悬MH-S细胞。

• 按1:2或1:3的比例接种到新的培养瓶中。

细胞冻存

• 准备冻存液：90%胎牛血清 + 10% DMSO。

• 收集对数生长期的MH-S细胞。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃上清液。

• 用冻存液重悬MH-S细胞，调整细胞密度至1-2 × 10^6 cells/ml。

• 将细胞悬液分装到冻存管中，每管1 ml。

• 将冻存管置于程序降温盒中，-80°C冰箱中保存过夜。

• 转移到液氮中进行长期保存。

注意事项

• 细胞特性：MH-S细胞为半贴壁生长，传代时需同时收集悬浮和贴壁细胞。首次传代建议使用T25培养瓶进行1:2比例传代。

• 定期观察：定期检查MH-S细胞的形态和生长状态。

• 无菌操作：严格遵循无菌操作规程，避免MH-S细胞污染。

• 支原体检测：定期进行支原体、细菌和真菌检测以确保MH-S细胞无污染。

安全事项

• 生物安全等级：MH-S细胞的生物安全等级为2级。在生物安全2级（BSL-2）实验室内操作MH-S细胞，遵守相关安全规程。

• 个人防护：操作MH-S细胞时必须穿戴实验服、手套、口罩等个人防护装备，避免直接接触细胞或培养液。

• 无菌操作：在生物安全柜内进行MH-S细胞培养操作，使用经过消毒的器材和试剂。

• 废弃物处理：所有接触过MH-S细胞的废弃物需经过高压灭菌或化学消毒处理后再丢弃。锐器需放入专用锐器盒中处理。

• 意外处理：制定意外泄漏或暴露的应急预案，发生意外接触MH-S细胞时立即采取相应措施并报告实验室负责人。

• 液氮操作安全：操作液氮时需小心，使用专用防护设备，避免冻伤。

• 化学品安全：安全使用和储存培养基、血清、DMSO等化学试剂，并了解所用试剂的安全数据表（SDS）。