Sp20细胞（全名Sp2/0-Ag14细胞）是来源于小鼠脾脏的B淋巴细胞系，常用于免疫学研究。sp20细胞系通过将BALB/c小鼠的脾细胞（经绵羊红细胞免疫处理的小鼠）与P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合形成。

SP20细胞特性特征

• 分子和表达特征：不分泌免疫球蛋白、对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤具有抗性、对HAT（Hypoxanthine-Aminopterin-Thymidine）敏感

• 抗原表达：H-2d

• 应用：可用作制备单克隆抗体的细胞系、可作为细胞融合实验的伴侣细胞系、在免疫学和细胞生物学研究中是重要的工具细胞系

• 免疫球蛋白基因表达缺失：由于不分泌免疫球蛋白的特性,Sp2/0-Ag14细胞系在基因水平上缺乏相关的免疫球蛋白基因表达

SP20细胞参数表

Sp20小鼠骨髓瘤细胞培养教程

SP20细胞复苏

• 解冻SP20细胞： 将SP20细胞冻存管从液氮中取出，立即放入37℃水浴中，快速摇匀，使其在1分钟内完全融化。

• 稀释SP20细胞： 将解冻后的SP20细胞悬液转移到离心管中，加入4 mL培养基，轻轻混匀。

• 离心： 在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。

• 重悬SP20细胞： 补加1-2 mL培养基，轻轻吹匀。

• 接种： 将SP20细胞悬液加入培养瓶或培养皿中，培养过夜，第二天更换培养液并检查细胞密度。

SP20细胞传代

• 检查SP20细胞密度： 当SP20细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 洗涤SP20细胞： 弃去培养上清，用PBS润洗SP20细胞1-2次。

• 消化SP20细胞： 加入1 mL消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱中观察SP20细胞脱落情况。

• 终止消化： 当SP20细胞完全脱落后，加入2-3 mL培养基以终止消化反应。

• 离心： 将SP20细胞悬液转移至离心管中，离心1000 RPM 4分钟，弃去上清。

• 重悬SP20细胞： 补加适量培养基，轻轻吹匀，将SP20细胞悬液按比例接种到新的培养瓶中。

SP20细胞冻存

• 准备SP20细胞： 选择健康的SP20细胞，进行离心并重悬于冻存液中，细胞浓度通常为5×10⁶细胞/mL。

• 分装： 将1 mL SP20细胞悬液分装到冻存管中，密封并标记细胞名称和冻存日期。

• 冷冻： 将冻存管放入-80°C冰箱中冷冻24小时，然后转移至液氮中长期保存。

SP20细胞的生长表现

• 生长速度： 在适当的培养基和条件下，SP20细胞的倍增时间通常为24-36小时。

• 不同培养容器中的表现： SP20细胞在培养瓶、培养皿和悬浮培养系统中均表现良好，悬浮培养系统可进一步提高SP20细胞的生长速度和产量。

注意事项

• 保持无菌操作，避免交叉污染。

• 定期检查SP20细胞生长状态，确保其处于良好状态。

• 根据实验需求调整培养基成分和添加生长因子。