P3X63Ag8鼠骨髓瘤细胞源自P3K细胞株，后者起源于浆细胞MOPC-21的组织培养株。P3X63Ag8细胞系为超二倍体，模态数为65。P3X63Ag8细胞表达抗原H-2d和免疫球蛋白，并产生单克隆抗体。经检测，发现鼠痘病毒呈阴性。

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞特性特征

• 抗原表达：表达H-2d抗原。

• 基因表达：能够表达免疫球蛋白和单克隆抗体。

• p3x63ag8细胞缺乏3-酮类固醇还原酶活性，是胆固醇营养缺陷型细胞。

• 对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性。

• 在HAT（次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶）培养基中无法存活。

• p3x63ag8细胞能够生成但不分泌免疫球蛋白

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞参数表

细胞名称	P3X63Ag8（小鼠骨髓瘤细胞）
细胞类型	小鼠骨髓瘤细胞
细胞来源	P3K细胞株，源自浆细胞MOPC-21的组织培养株
细胞形态	淋巴母细胞样
生长特性	悬浮生长
模态数	65（超二倍体）
抗原表达	H-2d
基因表达	免疫球蛋白，单克隆抗体
倍增时间	2-3天
安全等级	BSL1
培养基	RPMI-1640 + 10% FBS
培养条件	37°C，5% CO2
传代比例	1:2
冻存条件	基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS，液氮保存
细胞密度	1x10^5 到 1x10^6 cells/mL
pH值	7.0-7.4
渗透压	280-320 mOsm/kg
抗性	对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性
敏感性	在HAT培养基中死亡
胆固醇营养	由于缺失3-酮类固醇还原酶活性，这些细胞是胆固醇营养缺陷型细胞
病毒检测	鼠痘病毒阴性
支原体检测	阴性
细菌、酵母和真菌检测	阴性
主要用途	杂交瘤融合的配体细胞，单克隆抗体生产
其他用途	骨髓瘤相关研究，化学药物和MicroRNA治疗研究

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞培养教程

P3X63Ag8细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的P3X63Ag8细胞，在37°C水浴中快速解冻（1-2分钟）。

• 将P3X63Ag8细胞悬液转移到含10mL预热培养基的15mL离心管中。

• 以800 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞，转移到培养瓶中。

常规培养

• 保持P3X63Ag8细胞密度在1x10^5到1x10^6 cells/mL之间。

• 每2-3天观察P3X63Ag8细胞状态，根据需要进行传代。

传代步骤

• 收集P3X63Ag8细胞悬液，以800 rpm离心5分钟。

• 弃去上清，用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞。

• 按1:2的比例分配到新的培养瓶中。

• 补充新鲜培养基至适当体积。

P3X63Ag8细胞冻存

• 准备冻存液：基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS。

• 收集对数生长期的P3X63Ag8细胞并计数。

• 调整P3X63Ag8细胞浓度至2-5x10^6 cells/mL。

• 将P3X63Ag8细胞悬液与等体积的2倍浓度冻存液混合。

• 分装到冻存管中，每管1mL。

• 使用程序降温盒在-80°C冰箱中缓慢降温。

• 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 定期检查P3X63Ag8细胞形态和生长状态。

• 保持无菌操作，防止污染。

• 避免P3X63Ag8细胞过度生长或密度过低。

• 定期进行支原体检测。

• 若不使用抗生素，需更频繁地更换培养基。

特殊处理

• 由于P3X63Ag8细胞是胆固醇营养缺陷型，可能需要在培养基中额外添加胆固醇或相关前体物质。

质量控制

• 定期检查P3X63Ag8细胞的生长曲线和倍增时间。

• 监测P3X63Ag8细胞的抗体产生能力（如适用）。

• 进行P3X63Ag8细胞特性鉴定，如流式细胞术分析表面标记物。