95C细胞源自一名65岁中国男性肺巨细胞癌患者的腹水转移病灶，属于人肺巨细胞癌细胞系PLA-801的一个亚系。PLA-801细胞系包含了4个通过单细胞克隆技术分离的亚系，即95A、95C、95D、95E，其中95C细胞具有较低的转移能力。95C细胞与高转移能力的95D细胞来自同一个原代细胞系，但在侵袭性和迁移性方面明显弱于95D细胞。

95C细胞特性特征

• 95C细胞具有致瘤性，能够在裸鼠体内形成肿瘤。皮下接种裸鼠后，95C细胞自发转移的发生率较低。

• 95C细胞的基因表达谱与高转移细胞系95D相比，存在显著差异，尤其在与细胞迁移和侵袭相关的基因上。研究显示，某些与细胞增殖、转移和死亡相关的基因在95C细胞中表达水平较低。

• 95C细胞的磷酸化蛋白质组与高转移细胞系95D的比较分析显示，95C细胞中某些关键蛋白的磷酸化水平较低。

95C细胞参数表

95C人肺巨细胞癌细胞(低转移)培养教程

细胞复苏

• 从液氮罐中取出冻存的95C细胞管，迅速放入37°C水浴中融化，轻轻摇动直至冰块完全融化。

• 将95C细胞悬液移至15 ml离心管中，缓慢加入10 ml预温的RPMI 1640培养基，轻轻混匀。

• 以300×g离心5分钟，弃去上清，用5 ml新鲜的培养基重悬95C细胞。

• 将95C细胞悬液接种于T25培养瓶中，添加10-12 ml培养基。

• 置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。24小时后更换培养基以去除非贴壁的95C细胞。

细胞培养

• 在培养95C细胞的过程中，每2-3天更换一次培养基，保持95C细胞在适宜的生长环境中。当95C细胞生长至80-90%汇合时，进行传代操作。

传代方法

• 弃去旧的培养基，用PBS轻轻洗涤95C细胞一次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C下消化3-5分钟，观察95C细胞的脱落情况。

• 当95C细胞大部分脱落时，加入等量培养基终止消化作用。

• 将95C细胞悬液转移至15 ml离心管中，300×g离心5分钟。

• 弃去上清，用新鲜预温的培养基重悬95C细胞。

• 计数后，根据需要按1:2至1:4的比例将95C细胞接种至新的培养瓶中，添加适量培养基。

注意事项

• 在传代95C细胞的过程中，消化时间需严格控制，以避免过度消化导致95C细胞损伤。

• 95C细胞接种后的24小时内避免换液，以确保95C细胞顺利贴壁。

• 传代时应尽量避免培养基中产生气泡，因为气泡可能会影响95C细胞的正常生长。