B82小鼠肿瘤细胞系源自小鼠脂肪组织中的成纤维细胞，其前身是NCTC克隆929细胞系，B82细胞系通过在溴脱氧尿苷（BUdR）中的渐进选择过程而得到。B82细胞具有70-80%的高克隆效率，常用于染色体分析和遗传杂交研究。其核型为2n=51。

B82小鼠肿瘤细胞系参数表

B82小鼠肿瘤细胞系培养教程

B82细胞复苏

• 将含有1 mL B82细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。

• 加入4-5 mL预热的完全培养基，混合均匀。

• 在1000 RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液。

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬B82细胞。

• 将B82细胞悬液转移到含有8 mL培养基的培养瓶或10 cm培养皿中。

• 置于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。

• 次日换液并检查B82细胞密度和状态。

B82细胞传代

• 当B82细胞密度达80%-90%时，进行传代：

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗B82细胞1-2次。

• 加入1 mL 0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA消化液，37℃消化1-3分钟。

• 显微镜下观察，当大部分B82细胞变圆并脱落时，加入少量培养基终止消化。

• 补加6-8 mL培养基，轻轻打匀。

• 1000 RPM离心4分钟，弃去上清。

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬B82细胞。

• 按1:2至1:6的比例将B82细胞分装到新的培养瓶中，每瓶加入8 mL完全培养基。

• 置于37℃、5% CO2培养箱中培养。

B82细胞冻存

• 收集处于良好生长状态的B82细胞。

• 1000 RPM离心4分钟，弃去上清。

• 用PBS洗涤一次。

• 加入无血清细胞冻存液，调整B82细胞密度至5×10^6~1×10^7/mL。

• 每支冻存管分装1 mL B82细胞悬液，做好标识。

• 将冻存管放入-80℃冰箱24小时。

• 转入液氮中长期保存。

B82细胞系培养的特殊之处

• 培养基组成：B82细胞的培养基通常为MEM培养基，配以10%胎牛血清（FBS）。某些细胞系可能使用不同类型的培养基（如DMEM或RPMI）。

• 传代比例：B82细胞的传代比例通常为1:2至1:6，而其他细胞系可能有不同的传代比例要求。

• 克隆形成能力：B82细胞具有70-80%的克隆形成能力，这使其在某些实验（如遗传杂交研究）中表现出色，而其他细胞系的克隆形成能力可能较低。

• 冻存和复苏条件：B82细胞在冻存和复苏过程中需要特别注意DMSO的浓度和冻存步骤，确保细胞存活率较高。